髓過(guò)氧化物酶在內(nèi)皮細(xì)胞增殖凋亡中的作用.pdf

1、目的：內(nèi)皮細(xì)胞損傷是動(dòng)脈粥樣硬化形成的始動(dòng)環(huán)節(jié)，國(guó)內(nèi)外研究均證實(shí)心絞痛患者冠脈局部?jī)?nèi)皮受損及功能紊亂與病情嚴(yán)重程度相一致，內(nèi)皮損傷的加重是病情惡化以及急性冠脈事件發(fā)生的病理生理基礎(chǔ)，內(nèi)皮損傷、內(nèi)皮功能不全對(duì)于蝕損斑塊內(nèi)皮糜爛血栓形成具有重要意義；髓過(guò)氧化物酶(MPO)水平不僅是內(nèi)皮功能不全的獨(dú)立預(yù)測(cè)因子，而且可以反映動(dòng)脈粥樣硬化斑塊內(nèi)的氧化應(yīng)激程度。氧化應(yīng)激可以介導(dǎo)細(xì)胞凋亡。研究發(fā)現(xiàn)蝕損斑塊內(nèi)皮糜爛處MPO含量明顯升高，內(nèi)皮細(xì)胞凋亡增加

2、，提示MPO與內(nèi)皮細(xì)胞凋亡之間可能存在內(nèi)在的聯(lián)系，本研究試圖探討MPO與內(nèi)皮細(xì)胞增殖與凋亡之間的關(guān)系。 方法：首先采用MTT比色法檢測(cè)在0.01～0.2 u/ml濃度范圍內(nèi)的MPO對(duì)體外培養(yǎng)的ECV304內(nèi)皮細(xì)胞增殖的影響，確定MPO抑制ECV304內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖的有效濃度。其次通過(guò)A0/EB染色結(jié)合熒光顯微鏡技術(shù)觀察該有效濃度的MPO對(duì)ECV304內(nèi)皮細(xì)胞凋亡的形態(tài)學(xué)改變，同時(shí)進(jìn)一步采用流式細(xì)胞儀檢測(cè)該濃度誘導(dǎo)EcV304

3、內(nèi)皮細(xì)胞凋亡的凋亡率。 結(jié)果：在0.01～0.2 u/ml濃度范圍內(nèi)，僅有濃度為0.1u/ml的MPO顯著抑制體外培養(yǎng)的ECV304內(nèi)皮細(xì)胞的生長(zhǎng)和增殖，顯示MPO抑制ECV304內(nèi)皮細(xì)胞的生長(zhǎng)和增殖具有濃度選擇性。AO/EB染色結(jié)合熒光顯微鏡技術(shù)和流式細(xì)胞儀技術(shù)均發(fā)現(xiàn)0.1u/ml濃度的MPO促進(jìn)ECV 304內(nèi)皮細(xì)胞凋亡，且呈時(shí)間依賴性。 結(jié)論：0.1u/ml濃度的MPO抑制體外培養(yǎng)的ECV304內(nèi)皮細(xì)胞的生長(zhǎng)和增殖