血紅素氧合酶-1對(duì)哮喘大鼠氣道炎癥及IL-10的影響.pdf

1、目的：通過(guò)建立大鼠哮喘模型，研究HO-1 表達(dá)的變化對(duì)哮喘氣道炎癥的影響，分析HO-1 與IL-10 在哮喘發(fā)生、發(fā)展中的關(guān)系及作用，探討HO-1 在哮喘中的免疫調(diào)抑作用機(jī)制。 方法： 取4 周齡雄性SD 大鼠，第一天用10％卵清蛋白（Ovalbumin,OVA）混懸液1ml（含10％氫氧化鋁、滅活百日咳桿菌）腹腔注射致敏、2 周后超聲霧化吸入2％ OVA 激發(fā)，復(fù)制哮喘動(dòng)物模型；設(shè)置不同干預(yù)組，在每次激發(fā)前分別用血晶素

2、（Hemin）、鋅-原卟啉（Zinc protoporphyrin- IX, ZnPP）或地塞米松（DXM）干預(yù)處理，末次激發(fā)24 小時(shí)后麻醉處死大鼠，取激發(fā)后各組動(dòng)物支氣管肺泡灌洗液（BALF）及肺組織，分別測(cè)定BALF 中細(xì)胞總數(shù)和嗜酸性粒細(xì)胞（EOS）百分比，用免疫組織化學(xué)法測(cè)定肺組織HO-1 的變化，ELISA 法測(cè)定BALF 上清液中IL-10 的量，并分析HO-1 與IL-10 之間的相關(guān)性，結(jié)合肺組織病理學(xué)檢測(cè)分析氣道炎癥

3、狀況。 結(jié)果： 1. 哮喘模型的建立：與對(duì)照組相比，模型組大鼠出現(xiàn)了明顯的呼吸窘迫癥狀： 呼吸急促、輔助呼吸肌收縮、青紫等表現(xiàn)。肺組織病理學(xué)顯示氣道周?chē)黠@炎癥改變、BALF 細(xì)胞學(xué)顯示EOS 百分比明顯增加（P<0.01），提示哮喘大鼠模型復(fù)制成功。經(jīng)Hemin、DXM 干預(yù)后，大鼠激發(fā)后癥狀較模型組明顯改善；而ZnPP 組則與模型組無(wú)顯著差異。 2. 病理組織學(xué)：模型組、Hemin 組、ZnPP 組和DXM

4、組氣道組織均可見(jiàn)EOS等炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)，但Hemin 組、DXM 組氣道炎癥明顯輕于模型組和ZnPP組。 3. BALF 細(xì)胞學(xué)檢測(cè)：Hemin 組、DXM 組細(xì)胞總數(shù)及EOS 百分比明顯低于模型組和ZnPP 組（P<0.05）；Hemin 組和DXM 組、及模型組和ZnPP 組兩間細(xì)胞總數(shù)及EOS 百分比則差異無(wú)顯著意義（P>0.05）。 4. 免疫組織化學(xué)顯示：模型組HO-1 表達(dá)較對(duì)照組增高（P<0.01），對(duì)照組僅

5、有少量表達(dá)；與模型組相比，經(jīng)Hemin、DXM 處理后HO-1 表達(dá)明顯增加（P<0.01），Hemin 組和DXM 組兩組間比較差異無(wú)顯著意義（P>0.05）；ZnPP組與模型組兩組間比較HO-1 表達(dá)差異無(wú)顯著意義（P >0.05）。HO-1 陽(yáng)性細(xì)胞主要定位于巨噬細(xì)胞、氣道上皮細(xì)胞，平滑肌細(xì)胞也可見(jiàn)表達(dá)。 5. IL-10 量：致敏、激發(fā)后模型組BALF 上清液中IL-10 表達(dá)較對(duì)照組明顯減低（P<0.05）；但經(jīng)Hem

6、in、DXM 處理后IL-10 含量明顯高于模型組（P<0.01），Hemin 組和DXM 組差異無(wú)顯著意義（P>0.05）；而ZnPP 組與模型組IL-10量差異無(wú)顯著性（P>0.05）。 6. 模型組、Hemin 組、ZnPP 組和DXM 組的HO-1 表達(dá)量與IL-10 量的變化方向相同；Spearman 相關(guān)系數(shù)為r =0.718，P<0.01（雙側(cè)），說(shuō)明HO-1 表達(dá)量與IL-10 含量之間有高度正相關(guān)的直線相關(guān)關(guān)系

7、。 結(jié)論： 1. 卵蛋白（OVA）與免疫佐劑氫氧化鋁、滅活百日咳桿菌致敏、激發(fā)能夠成功復(fù)制哮喘大鼠模型。 2. 支氣管哮喘大鼠肺組織HO-1 蛋白表達(dá)明顯增加。 3. HO-1 陽(yáng)性細(xì)胞主要定位于肺巨噬細(xì)胞、氣道上皮細(xì)胞。 4. HO-1 激動(dòng)劑Hemin、及地塞米松（DXM）均可上調(diào)HO-1 的表達(dá)。 5. HO-1 表達(dá)上調(diào)能顯著抑制過(guò)敏性氣道炎癥。 6. Hemin 與地塞米