‘紅葉’杜仲不同外植體愈傷組織和叢生芽的誘導(dǎo)及增殖研究.pdf

1、‘紅葉’杜仲（Eucommia ulmoides‘Hongye’）是杜仲科(Eucommiaceae)杜仲屬(Eucommia Oliver)植物杜仲(Eucommia ulmoides Oliver)的觀賞品種，擁有重要的觀賞價(jià)值和經(jīng)濟(jì)價(jià)值，應(yīng)用前景非常廣闊。目前‘紅葉’杜仲的主要繁殖方式以嫁接繁殖為主，由于嫁接所需材料多，繁殖周期長，制約了‘紅葉’杜仲工廠化生產(chǎn)和推廣應(yīng)用。因此，本文探討用組織培養(yǎng)方法來繁殖‘紅葉’杜仲。
　　

2、本實(shí)驗(yàn)以二年生‘紅葉’杜仲為材料，研究了消毒劑種類和消毒時(shí)間對(duì)外植體誘導(dǎo)的影響;外植體種類和采樣時(shí)間、基本培養(yǎng)基、外源添加物、激素種類和濃度等對(duì)叢生芽和愈傷組織誘導(dǎo)率的影響;并對(duì)誘導(dǎo)出的叢生芽進(jìn)行叢生芽增殖試驗(yàn)，對(duì)誘導(dǎo)出的愈傷組織進(jìn)行增殖和叢生芽的誘導(dǎo)試驗(yàn)。取得了以下主要結(jié)果:
　　1.消毒劑種類和消毒時(shí)間對(duì)外植體的存活率有顯著影響。適合‘紅葉’杜仲的消毒劑為75％酒精和0.1％升汞交替使用;消毒時(shí)間因外植體種類而異;不同外植體的

3、存活率存在差異。適合葉片和頂芽的消毒條件是:75％酒精45 s和0.1％升汞消毒3 min;口葉片的存活率88.89％，頂芽的存活率為22.23％。適合帶芽莖段和莖段的消毒條件是:75％酒精45 s和0.1％升汞消毒5 min;帶芽莖段和莖段的存活率均為66.67％。
　　2.外植體的種類對(duì)‘紅葉’杜仲叢生芽和愈傷組織的誘導(dǎo)率有顯著影響。外植體的采樣部位對(duì)叢生芽和愈傷組織的誘導(dǎo)率沒有顯著差異。適合叢生芽誘導(dǎo)的外植體是帶芽莖段，項(xiàng)芽

4、誘導(dǎo)的叢生芽易褐化落葉，莖段和葉片不能誘導(dǎo)產(chǎn)生叢生芽;適合愈傷組織誘導(dǎo)的外植體是葉片;主枝和側(cè)枝上采集的外植體誘導(dǎo)率沒有顯著差異。
　　3.基本培養(yǎng)基的種類對(duì)叢生芽和愈傷組織的誘導(dǎo)有顯著影響。適合‘紅葉’杜仲叢生芽和愈傷組織誘導(dǎo)的基本培養(yǎng)基均為MS培養(yǎng)基。帶芽莖段在MS培養(yǎng)基上叢生芽誘導(dǎo)率56.67％;葉片愈傷組織誘導(dǎo)率達(dá)90.0％。
　　4.蔗糖濃度為30g/L時(shí)，叢生芽誘導(dǎo)率達(dá)到最高為56.67％，愈傷組織誘導(dǎo)率達(dá)到最高

5、為90％?；钚蕴磕茱@著降低帶芽莖段的褐化率，當(dāng)活性炭濃度為1.0 g/L時(shí)，叢生芽褐化率最低為10.0％，叢生芽誘導(dǎo)率最高為63.33％。
　　5.激素種類和濃度對(duì)叢生芽和愈傷組織的誘導(dǎo)表現(xiàn)為:6-BA對(duì)帶芽莖段叢生芽誘導(dǎo)有顯著的促進(jìn)作用，NAA和GA3對(duì)帶芽莖段的叢生芽誘導(dǎo)有顯著的抑制作用，當(dāng)6-BA濃度為1.0 mg/L，叢生芽誘導(dǎo)率最高為86.67％。愈傷組織的誘導(dǎo)需要NAA，當(dāng)NAA與6-BA比值為2時(shí)，帶芽莖段和葉片愈傷

6、組織誘導(dǎo)率為100％。
　　6.外植體采樣時(shí)間對(duì)‘紅葉’杜仲叢生芽和愈傷組織的誘導(dǎo)率有顯著影響?！t葉’杜仲外植體采樣最佳時(shí)間為3月，這個(gè)時(shí)間的叢生芽和愈傷組織的誘導(dǎo)率最高。叢生芽誘導(dǎo)率由高到低依次為:3月＞4月＞5月＞9月＞7月=11月;愈傷組織誘導(dǎo)率由高到低依次為:3月＞4月＞5月＞9月＞7月＞11月。
　　7.適合叢生芽的增殖培養(yǎng)基為:MS+6-BA1.0 mg/L，叢生芽增殖系數(shù)最大，為189％。適合愈傷組織的繼代培