Podocin在缺血-再灌注大鼠腎臟足細胞中的表達及烏司他丁的干預作用.pdf

1、目的：探討腎缺血-再灌注對足細胞的損傷情況及足細胞相關蛋白Podocin的表達變化并觀察烏司他丁對足細胞的保護作用及對其相關蛋白的表達的影響,為臨床預防腎臟缺血。再灌注引發(fā)急性缺血性。腎功損傷等腎臟疾病提供理論基礎。 方法：78只雄性SD大鼠隨機分為三大組：對照組(c)36只,模型組(M)即腎臟單純?nèi)毖M(I)與缺血.再灌注模型組(I/R)共36只,和烏司他丁組(U)6只。M和U組大鼠夾閉雙側(cè)腎動脈60min后重新開放腎臟血供,

2、制作腎臟I/R模型,C組不夾閉雙側(cè)腎動脈。U組缺血前30min及再灌注開始時尾靜脈注射烏司他丁1萬單位,C和M組分別注射生理鹽水1ml。C和M組于再灌注后0min(缺血組)、30、60min、3、12、24h分別開腹留取腎組織,U組于再灌注60min時留取組織,應用電鏡觀察C、I、I/R60min、24h、U組足細胞形態(tài)變化,免疫組化及RT-PCR觀察各組足細胞相關蛋白podocin的分布及mRNA表達量的變化。 結(jié)果：(1)透

3、射電鏡顯示:Ⅰ組損傷較輕,僅見足細胞腫脹,輕微融合；I/R60min組足細胞足突廣泛融合、消失；I/R24h組基本恢復正常,僅少數(shù)部分區(qū)域有足突融合。U組足細胞足突增寬程度不明顯,未見足細胞足突缺失。C組腎小球足細胞足突排列正常。(2)免疫組化顯示:C組podocin染色呈現(xiàn)沿腎小球毛細血管粗線樣分布,I和I/R30min組podocin呈現(xiàn)除不連續(xù)粗線樣分布外局部呈粗顆粒狀；I/R60min、3h組呈不連續(xù)細線狀分布；12h組呈粗大顆

4、粒狀；24h分布呈粗細交替線狀分布；U組podocin染色為細線狀分布。(3)RT-PCR半定量顯示：與C相比,I/R30、60min和3h組podocin mRNA表達顯著上調(diào)(p<0.05);12h、24h組恢復正常；各缺血-再灌注組分別與單純?nèi)毖M比較,30、60min組podocin mRNA表達顯著上調(diào)(p<0.05);U組podocin mRNA表達同C組無明顯差別。 結(jié)論：腎缺血-再灌注能引起足細胞的損傷,在此過程