宮內(nèi)生長受限新生大鼠腦肝SOD、MDA水平研究.pdf

1、胎兒宮內(nèi)生長受限(Fetal growth resttiction,FGR)指胎兒在宮內(nèi)的生長受到各種各樣器質(zhì)性或功能性因素的影響而未達(dá)到其生長潛能的一種狀態(tài),是引起圍產(chǎn)期新生兒死亡的第二大因素,其新生兒的近期和遠(yuǎn)期并發(fā)癥均明顯升高. FGR不僅與成人期心血管疾病、Ⅱ型糖尿病和激素依賴性疾病等密切相關(guān),同時(shí)還可引起神經(jīng)發(fā)育的改變,可導(dǎo)致從輕微性格行為改變到腦癱、智力低下等不同程度的神經(jīng)系統(tǒng)損傷. 近幾年來,已有大量研究表

2、明了氧化應(yīng)激與神經(jīng)系統(tǒng)損傷的重要關(guān)系.FGR的胎兒長期處于一種相對低氧及低營養(yǎng)供給的環(huán)境中,我們推測FGR的胎兒也可能在存在氧化應(yīng)激損傷,這可能與其不良的神經(jīng)系統(tǒng)預(yù)后有關(guān). 本課題通過建立SD大鼠FGR模型后檢測FGR新生大鼠腦肝組織超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和丙二醛(malondialdehyde,MDA)來驗(yàn)證這一假設(shè). 第一部分:應(yīng)用缺血再灌注法建立SD大鼠FGR模型

3、 材料與方法: 1.FGR動(dòng)物模型: 將孕17天齡實(shí)驗(yàn)組SD大鼠麻醉后,通過鉗夾右側(cè)子宮卵巢血管30分鐘形成缺血再灌注制成FGR大鼠模型,對照組除了不進(jìn)行血管鉗夾外其他同實(shí)驗(yàn)組.在孕21時(shí)天,對兩組孕鼠實(shí)施剖宮產(chǎn)手術(shù),記錄各組死胎數(shù)目及新生鼠情況.迅速處死新生大鼠,取出腦組織及肝臟置于-70度冰箱保存. 2.FGR定義及分組: 將對照組中新生鼠平均體重減兩個(gè)標(biāo)準(zhǔn)差作為FGR的診斷標(biāo)準(zhǔn).實(shí)驗(yàn)組中除了FGR的

4、定義為非FGR. 3.比較項(xiàng)目: 實(shí)驗(yàn)組及對照組的胎鼠死亡率,FGR發(fā)生率;實(shí)驗(yàn)組中左右子宮角的FGR發(fā)生率;FGR組,非FGR組及對照組中各新生鼠腦重、肝重及腦肝比值. 4.統(tǒng)計(jì)學(xué)處理: 應(yīng)用SPSS11.0 for Windows統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì),所有計(jì)量資料以夏±SD表示,P<0.05表示差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義. 結(jié)果: 1.對照組中有一只孕鼠于麻醉中意外死亡,總共有15只孕鼠納入本

5、研究,其中實(shí)驗(yàn)組8只,對照組7只. 2.胎鼠死亡率實(shí)驗(yàn)組4.55﹪(5/110),對照組3.19﹪(3/94),兩者比較無顯著性差異(P>0.05). 3..FGR發(fā)生率實(shí)驗(yàn)組21.9﹪(23/105),對照組3,3﹪(3/91),兩者比較有非常顯著性差異(P<0.001).實(shí)驗(yàn)組中,右側(cè)子宮角FGR鼠發(fā)生率22.22﹪(12/51),左側(cè)子宮角FGR發(fā)生率20.37﹪(11/54),兩者比較無顯著性差異(P>0.05)

6、. 4.FGR組新生鼠平均出生體重、腦重及肝重較非FGR組及對照組均明顯降低(P<0.01),而腦肝比值卻較其他兩組明顯上升(P<0.01). 結(jié)論: 1.應(yīng)用單側(cè)子宮角血管鉗夾法,可通過缺血再灌注損傷,誘導(dǎo)同側(cè)和對側(cè)子宮角內(nèi)胎鼠發(fā)生FGR. 2.本法制作動(dòng)物模型具有FGR發(fā)生率高、孕鼠及胎鼠死亡率低,操作相對簡單等優(yōu)點(diǎn),適合實(shí)驗(yàn)研究. 第二部分:宮內(nèi)生長受限新生大鼠腦肝SOD, MDA水平測定

7、 材料和方法1.材料:第一部分中所保存的新生鼠的腦組織和肝臟. 2.方法: SOD測定采用黃嘌呤氧化酶法,MDA測定采用硫代巴比妥酸法(TBA),參照南京建成生物工程公司所提供的操作說明進(jìn)行. 3.分組: 隨機(jī)抽取FGR組20例,非FGR組及對照組中各25例腦組織和肝臟. 4. 比較項(xiàng)目: 不同組別腦肝SOD及MDA水平. 5.統(tǒng)計(jì)學(xué)處理: 應(yīng)用SPSS11.0 fo

8、r Windows統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì),所有計(jì)量資料以x±SD表示,P<0.05表示差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義. 結(jié)果： 1.FGR組腦組織SOD 水平為53.564±17.510 U/mgprot,非FGR組為57.093±16.309 U/mgprot,對照組為54.825±12.021 U/mgprot.三組比較均無明顯差異(P>0.05). 2.FGR組肝組織SOD水平為94.912±13.472 U/mgpro

9、t,非FGR組為95.32±17.578 U/mgprot,對照組為103.271±14.477 U/mgprot.三組比較均無明顯差異(P>0.05). 3.FGR組腦組織MDA水平為2.51±10.785 nmol/mgprot,非FGR組為1.536±0.419 nmol/mgprot,對照組為1.438±0.555 nmol/mgprot.FGR組較非FGR組及對照組明顯升高,有非常顯著差異(P<0.01).非FGR組及

10、對照組比較無明顯差異(P>0.05). 4.FGR組腦組織MDA水平為4.939±0.972 nmol/mgprot,非FGR組為5.364±0.99 nmol/mgprot,對照組為5.456±0.906 nmol/mgprot.三組比較均無明顯差異(P>0.05). 結(jié)論： 1.FGR胎鼠腦、肝組織SOD水平無明顯變化. 2.FGR胎鼠腦組織MDA水平顯著增高,而肝組織MDA水平見明顯變化,提示FGR