應(yīng)用比較基因組雜交和多色熒光原位雜交分析肺癌染色體異常.pdf

1、目的：應(yīng)用比較基因組雜交技術(shù)(CGH)和多色熒光原位雜交技術(shù)(M-FISH)分析肺癌的染色體異常，了解染色體異常與肺癌不同病理類型和臨床特征之間的關(guān)系。 方法：試驗分為兩個部分，第一部分采用CGH技術(shù)對30例肺癌組織的DNA進(jìn)行檢測，以了解肺癌全基因組的變化；第二部分采用R顯帶核型分析、CGH和M-FISH對1例原發(fā)性小細(xì)胞肺癌標(biāo)本和2例肺癌細(xì)胞株染色體異常進(jìn)行同步分析，了解染色體擴(kuò)增或缺失與不平衡易位改變的關(guān)系。 結(jié)果

2、： 1.30例肺癌標(biāo)本中CGH都發(fā)現(xiàn)有染色體異常改變，每例標(biāo)本最少涉及2條染色體異常，不同病理類型肺癌染色體畸變數(shù)無明顯的差異。染色體基因擴(kuò)增的發(fā)生率比缺失高，比例約為2:1。 2．不同病理類型肺癌在1p11-p22、5p11-p14、16p11-P12、19q13、19p13、20p12和21q21等區(qū)域均有高頻的擴(kuò)增，在5q、6p24-pter、9p31-qter、13q21-qter和14q21-qter等區(qū)域均有

3、高頻的缺失。 3．不同病理類型肺癌的染色體異常表現(xiàn)也有一定的區(qū)別：(1)小細(xì)胞癌在6p12-p21和4p13-p15區(qū)域有高頻的擴(kuò)增達(dá)70％和50％，顯著高于鱗癌和腺癌(P<0.05，=0.05)；在11p11-p14和18q12區(qū)域擴(kuò)增頻數(shù)分別為70％和60％，都顯著高于腺癌(P<0.05，-<0.05)：在18p11區(qū)域擴(kuò)增頻數(shù)為50％，顯著高于鱗癌(P=0.05)；在8q22-qter和4q的缺失頻數(shù)均為50％，顯著高于鱗

4、癌(P<0.05，=0.05)。(2)鱗癌在2p12-p16區(qū)域的擴(kuò)增頻數(shù)為40％，顯著高于腺癌(P<0.05)；在3q24-qter區(qū)域鱗癌的擴(kuò)增頻數(shù)為40％，顯著高于小細(xì)胞癌(P<0.05)。(3)腺癌在2p和8q22-qter的缺失頻數(shù)均為50％，顯著高于鱗癌(P<0.05，<0.05)。 4．R顯帶在細(xì)胞株A-549和H-1299中分別發(fā)現(xiàn)4條和2條染色體異常，主要為染色體的大片段缺失、延伸或插入。原發(fā)性小細(xì)胞肺癌中染色

5、體十分的短小，R顯帶難以進(jìn)行分析。CGH在細(xì)胞株A-549、H-1299和原發(fā)性小細(xì)胞肺癌中分別發(fā)現(xiàn)有7條、6條和16條染色體畸變，主要為染色體擴(kuò)增或缺失。M-FISH在細(xì)胞株A-549、H-1299和原發(fā)性小細(xì)胞肺癌中分別發(fā)現(xiàn)有7個、8個和13個染色體異常，主要為染色體不平衡易位。 5．原發(fā)性小細(xì)胞肺癌細(xì)胞5、7、8、9、18、16、1和19發(fā)生染色體不平衡易位的幾率較高，常見的易位有t(9;14)、t(16；19)、t(16

6、；17)、t(2；5；18)和t(7；12；19)。 6．在細(xì)胞株A-549、H-1299和原發(fā)小細(xì)胞肺癌細(xì)胞中R顯帶和CGH發(fā)現(xiàn)的一些有延伸、擴(kuò)增或缺失的染色體，M-FISH在相應(yīng)的染色體上發(fā)現(xiàn)不平衡易位。 結(jié)論： 1．遺傳物質(zhì)的異常改變在肺癌細(xì)胞中普遍存在，肺癌細(xì)胞染色體擴(kuò)增比缺失更為常見，遺傳物質(zhì)異常是肺癌發(fā)生和發(fā)展的基礎(chǔ)。 2．不同病理類型肺癌(腺癌、鱗癌和小細(xì)胞肺癌)有共同的染色體異常區(qū)域，但在

7、一些染色體區(qū)域的異常有所不同，這可能導(dǎo)致三者不同的生物學(xué)特性，也可能為三者的鑒別診斷提供一種遺傳學(xué)標(biāo)志。 3．隨著惡性腫瘤病程的進(jìn)展，染色體畸變的復(fù)雜性也明顯的提高。 4．不同的致癌因素(如吸煙)可導(dǎo)致不同的染色體異常。 5．核型分析、CGH和M-FISH有各自的優(yōu)點(diǎn)與不足，聯(lián)合檢測能更深入和全面地了解肺癌的染色體異常。 6．原發(fā)肺癌組織的染色體異常比細(xì)胞株更為復(fù)雜和多變，對原發(fā)肺癌組織的染色體分析更能揭