比較基因組雜交技術(shù)在鑒定染色體異常中的應(yīng)用研究.pdf

1、比較基因組雜交(Comparative Genomic Hybridization，CGH)技術(shù)最早于1992年由Kallioniemi創(chuàng)建。它是一種分子細(xì)胞遺傳學(xué)方法，可以在全部染色體水平上對(duì)整個(gè)基因組序列的拷貝數(shù)進(jìn)行全面的檢測(cè)并進(jìn)行初步定位。其基本原理是用不同的熒光染料標(biāo)記正常的基因組DNA和待測(cè)組DNA，再和正常人的中期染色體雜交，通過(guò)檢測(cè)染色體上兩種熒光信號(hào)的相對(duì)強(qiáng)度比率，從而了解待測(cè)組DNA拷貝數(shù)的改變。這種技術(shù)最初應(yīng)用于實(shí)體

2、瘤的研究，現(xiàn)已廣泛應(yīng)用于血液系統(tǒng)疾病，染色體病，產(chǎn)前診斷以及植入前診斷等方面。 越來(lái)越多的研究表明，CGH技術(shù)不但具備熒光原位雜交(Fluorescent In Situ Hybridization,FISH)技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)，還克服了其需制備染色體特異區(qū)域探針且僅能檢測(cè)個(gè)別染色體或部分位點(diǎn)的局限性。一次實(shí)驗(yàn)即可檢測(cè)出待測(cè)標(biāo)本整個(gè)基因組 DNA 拷貝數(shù)的增減，大大提高了了染色體病診斷的全面性與準(zhǔn)確性，是一種全方位的檢測(cè)方法。因此，CG

3、H技術(shù)作為一種新的有效的分子遺傳學(xué)方法正被國(guó)內(nèi)外學(xué)者應(yīng)用于各種染色體疾病的診斷。 若將CGH技術(shù)應(yīng)用到臨床診斷中去，必須先在實(shí)驗(yàn)室建立這項(xiàng)技術(shù)。為此，首先利用已知的有染色體異常的建株細(xì)胞 DNA 為待測(cè)樣本進(jìn)行檢測(cè)，再得到與細(xì)胞遺傳學(xué)一致的結(jié)果上穩(wěn)定實(shí)驗(yàn)條件，隨后再進(jìn)行對(duì)未知標(biāo)本的檢測(cè)。 額外的小標(biāo)記染色體(Small Supernumerary MarkerChromosomes)在新生兒中的發(fā)生率約為O.14‰～0.

4、72‰，在胎兒的發(fā)生率約為O.4[％]-1.5[％]。帶有標(biāo)記染色體的患者，其多變的臨床表型是由于標(biāo)記染色體所含的遺傳物質(zhì)導(dǎo)致的。標(biāo)記染色體形態(tài)學(xué)的多變性和其較高的發(fā)生率給遺傳咨詢特別是產(chǎn)前診斷帶來(lái)了巨大的困難，快速簡(jiǎn)便的鑒定標(biāo)記染色體的來(lái)源也變得越來(lái)越重要。本實(shí)驗(yàn)將一例已知來(lái)源的額外小標(biāo)記染色體患者的建株細(xì)胞DNA作為待測(cè)樣本進(jìn)行了檢測(cè)，所得結(jié)果與分子細(xì)胞遺傳學(xué)結(jié)果一致。從而證明了CGH技術(shù)作為對(duì)額外小標(biāo)記染色體來(lái)源的檢測(cè)，是一項(xiàng)快速