星形細胞及少突膠質(zhì)細胞起源腫瘤染色體DNA失衡的比較基因組雜交研究.pdf

1、目的：
　　分析星形細胞及少突膠質(zhì)細胞起源腫瘤的染色體基因組DNA失衡狀態(tài)及失衡區(qū)帶分布特征，從全基因組范圍探討這兩類腫瘤的染色體基因組DNA失衡類型與其組織學(xué)分類、分級、發(fā)生部位及與患者性別和年齡的關(guān)系。旨在了解這兩類腫瘤的特異性分子遺傳學(xué)變異譜，以便為建立它們的分子遺傳學(xué)分類標(biāo)準(zhǔn)，尋找與它們發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)的責(zé)任基因和責(zé)任通路，以及基因治療和分子靶向藥物治療的策略優(yōu)化提供客觀的參考依據(jù)。
　　方法：
　　選取我院

2、神經(jīng)病理室2000-2008年存檔的“星形細胞起源腫瘤”石蠟包埋組織標(biāo)本63例，其中WHOⅠ級的毛細胞型星形細胞瘤(PA)10例、WHOⅡ級的彌漫型星形細胞瘤(DA)10例、WHOⅢ級的間變性星形細胞瘤(AA)12例、WHOⅣ級的膠質(zhì)母細胞瘤(GB)31例;同時選取“少突膠質(zhì)細胞起源腫瘤”石蠟包埋組織33例，其中WHOⅡ級的少突膠質(zhì)細胞瘤(ODG)16例、WHOⅢ級的間變性少突膠質(zhì)細胞瘤(AODG)17例。重新復(fù)習(xí)每例的HE染色切片確定

3、診斷。分別從石蠟包埋組織中提取腫瘤組織全基因組DNA，并提取正常青年男性志愿者外周血全基因組DNA作對照，經(jīng)切口平移標(biāo)記法制備雜交探針，用比較基因組雜交技術(shù)分析了它們的染色體全基因組DNA獲得和丟失片段及其分布特征。
　　結(jié)果：
　　1、63例星形細胞起源腫瘤染色體基因組DNA獲得及丟失的總檢出率分別為73.0％(46/63)和84.1％(53/63)。在22對常染色體及X染色體共檢測到41個基因組DNA獲得區(qū)帶和39個基因

4、組DNA丟失區(qū)帶。除Ⅳ級GB組的獲得區(qū)帶數(shù)分別多于Ⅰ級PA組、Ⅱ級DA組和Ⅲ級AA組的獲得區(qū)帶數(shù)，且差異均有顯著性外(P＜0.05～0.01)，其余染色體基因組DNA獲得和丟失區(qū)帶數(shù)的組間差異均無顯著性(P＞0.05)。各組內(nèi)染色體基因組DNA獲得與丟失區(qū)帶數(shù)的比較也均無顯著性差異(P＞0.05)。
　　2、Ⅰ級PA組、Ⅱ級DA組、Ⅲ級AA組和Ⅳ級GB組的+1q檢出率分別為0.0％(0/10)、30.0％(3/10)、16.7％(

5、2/12)、41.9％(13/31)，除Ⅰ級PA組與Ⅳ級GB組間+1q檢出率的差異有顯著性外(P＜0.05)，其余組間+1q檢出率的差異均無顯著性(P＞0.05);Ⅰ級PA組、Ⅱ級DA組、Ⅲ級AA組和Ⅳ級GB組的-15q檢出率分別為0.0％(0/10)、40.0％(4/10)、41.7％(5/12)、41.9％(13/31)，除Ⅰ級PA組分別與Ⅲ級AA組和Ⅳ級GB組間-15q檢出率的差異有顯著性外(P＜0.05)，其余組間-15q檢出率

6、的差異均無顯著性(P＞0.05);不同級別星形細胞起源腫瘤組間其余染色體基因組DNA獲得和丟失區(qū)帶檢出率的差異均無顯著性(P＞0.05)。
　　3、63例不同級別的星形細胞起源腫瘤中，男性病例占52.4％(33/63)。Ⅰ級PA組、Ⅱ級DA組、Ⅲ級AA組及Ⅳ級GB組男性病例的+Yq檢出率分別為25.0％(1/4)、66.7％(2/3)、14.3％(1/7)、31.6％(6/19)，差異無顯著性(P＞0.05);-Yq、+Yp及-Y

7、p僅見于Ⅳ級GB組男性病例，它們的檢出率依次為31.6％(6/19)、5.3％(1/19)、5.3％(1/19)，差異也無顯著性(P＞0.05)。
　　4、不同年齡、性別、部位星形細胞起源腫瘤特定染色體基因組DNA失衡區(qū)帶檢出率的比較顯示，除Ⅲ級AA組中≤35歲者的-4q和-10q檢出率高于＞35歲者外(P＜0.05);各級別星形細胞起源腫瘤組中其余染色體基因組DNA獲得和丟失區(qū)帶的檢出率均無年齡、性別及部位的差異(P＞0.05)

8、。
　　5、33例少突膠質(zhì)細胞起源腫瘤染色體基因組DNA獲得及丟失的總檢出率分別為84.9％(28/33)和66.7％(22/33)。在22對常染色體及X染色體共檢測到23個基因組DNA獲得區(qū)帶和24個基因組DNA丟失區(qū)帶，Ⅱ級ODG與Ⅲ級AODG組間染色體基因組DNA獲得和丟失區(qū)帶數(shù)的差異均無顯著性(P＞0.05)。兩組內(nèi)染色體基因組DNA獲得與丟失區(qū)帶數(shù)的比較也均無顯著性差異(P＞0.05)。
　　6、Ⅱ級ODG組和Ⅲ級

9、AODG組的+7p檢出率分別為6.3％(1/16)和41.2％(7/17)，-19q檢出率分別為50.0％(8/16)和17.7％(3/17)，-1p/-19q檢出率分別為37.5％(6/16)和5.9(1/17)，兩組間+7p、-19q和-1p/-19q檢出率的差異均有顯著性(P＜0.05);Ⅱ級ODG組和Ⅲ級AODG組間其余染色體基因組DNA獲得和丟失區(qū)帶的檢出率均無顯著性差異(P＞0.05)。
　　7、33例少突膠質(zhì)細胞起源

10、腫瘤中，男性病例占45.5％(15/33)。僅在Ⅲ級AODG組男性病例檢測到+Yq、+Yp及-Yp，它們的檢出率依次為20.0％(2/10)、10％(1/10)、10％(1/10)，差異無顯著性(P＞0.05)。
　　8、不同年齡和性別少突膠質(zhì)細胞起源腫瘤特定染色體基因組DNA獲得和丟失區(qū)帶檢出率的比較均無顯著性差異(P＞0.05)。
　　結(jié)論：
　　1、染色體基因組DNA失衡頻率及丟失區(qū)帶數(shù)的多少與星形細胞及少突膠質(zhì)

11、細胞起源腫瘤的級別均無關(guān)，而染色體基因組DNA獲得區(qū)帶數(shù)增加可能是導(dǎo)致Ⅱ級DA和Ⅲ級AA向Ⅳ級GB惡性進展的重要因素，但與少突膠質(zhì)細胞起源腫瘤的級別無關(guān)。
　　2、不同組織學(xué)類型和級別的星形細胞及少突膠質(zhì)細胞起源腫瘤均有各自特征性的染色體基因組DNA失衡譜，對區(qū)分它們的組織學(xué)類型和級別有重要參考價值，由此引起的基因異常是決定它們組織學(xué)表型和級別的重要分子遺傳學(xué)基礎(chǔ)。
　　3、+1q、+3p、+5q、+6q、+9q、+16q、

12、+18p、+19p、+21q、及-1p、-2q、-4p、-6p、-15q、-22q、-Xq是評價星形細胞起源腫瘤生物學(xué)行為的重要參考指標(biāo)，+7p、-19q和-1p/-19q是評價國人少突膠質(zhì)細胞起源腫瘤生物學(xué)行為、對放化療敏感性及患者預(yù)后的重要參考指標(biāo)。
　　4、-Yq、+Yp及-Yp僅見于男性Ⅳ級GB病例，對男性Ⅲ級AA與Ⅳ級GB的鑒別有一定參考價值;+Yq、+Yp、-Yp僅見于男性AODG，對男性Ⅱ級ODG與Ⅲ級AODG的鑒別

13、及生物學(xué)行為評價有一定參考價值。
　　5、除Ⅲ級AA組中≤35歲者的-4q和-10q檢出率高于＞35歲者并有顯著性差異外，發(fā)生在不同性別、不同年齡或不同部位的同一類型星形細胞起源腫瘤及少突膠質(zhì)細胞起源腫瘤的染色體基因組DNA失衡譜均無本質(zhì)區(qū)別。
　　6、-15q及此引起的相應(yīng)抑癌基因缺失可能是導(dǎo)致Ⅱ級DA、Ⅲ級AA和Ⅳ級GB發(fā)生、發(fā)展的重要因素;-1p、-19q或-1p/-19q引起的相應(yīng)基因缺失與少突膠質(zhì)細胞起源腫瘤的發(fā)生

14、、發(fā)展密切相關(guān)，并是決定其對放化療敏感性及患者預(yù)后的重要因素。
　　7、+7p也是國人星形細胞起源腫瘤與Ⅲ級AODG的主要染色體基因組DNA失衡類型，提示前者與后者有共同的分子遺傳學(xué)變異背景，由此引起的相應(yīng)原癌基因擴增在它們的發(fā)生、發(fā)展中起重要作用;含AODG成分的Ⅳ級GB可能是由發(fā)生+7p的Ⅲ級AODG惡性進展而來。
　　8、星形細胞及少突膠質(zhì)細胞起源腫瘤-1p和-19q的檢出率均較高，前者多為單獨丟失，而后者1p/19q