應(yīng)用流式細(xì)胞儀術(shù)和比較基因組雜交技術(shù)檢測肺癌組織細(xì)胞染色體異常.pdf

1、目的：應(yīng)用流式細(xì)胞儀(flowcytometrics，F(xiàn)CM)和比較基因組雜交技術(shù)(comparativegenomichybridization，CGH)技術(shù)對新鮮肺癌標(biāo)本進(jìn)行檢測，探討肺癌細(xì)胞的遺傳物質(zhì)的改變，揭示肺癌發(fā)生和發(fā)展的內(nèi)在本質(zhì)及其與臨床特征之間的關(guān)系。 方法：實驗分為兩個部分，第一部分將30例新鮮肺癌組織制成單細(xì)胞懸液，對DNA進(jìn)行染色后經(jīng)FCM檢測，以了解肺癌的DNA倍體分布。第二部分采用CGH技術(shù)對30例中的

2、17例肺癌組織的DNA進(jìn)行檢測，以了解肺癌的全基因組的變化。 結(jié)果：1．在經(jīng)FCM檢測的30例肺癌標(biāo)本中，DNA異倍體為19例，占所有標(biāo)本的63．3％，但DNA倍體分布與肺癌細(xì)胞的病理類型、分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移狀態(tài)和腫瘤大小等無關(guān)。 2．CGH技術(shù)檢測的17例肺癌標(biāo)本中均檢出染色體畸變(擴增和／或缺失)，而且每個病例涉及多條染色體畸變。每例最少涉及染色體畸變數(shù)4條，最高達(dá)24條。非小細(xì)胞肺癌(non-smallcelllun

3、gcancer,NSCLC)中，染色體擴增發(fā)生率數(shù)平均為7條／例，缺失為4．8條／例；小細(xì)胞肺癌(smallcelllungcancer，SCLC)中，擴增為8．4條／例，缺失為9．6條／例。擴增和缺失的發(fā)生率在兩者之間無顯著差異。 3．NSCLC和SCLC染色體畸變的部位和頻率有所不同： NSCLC染色體擴增部位和頻率SCLC染色體擴增部位和頻率 1p9／12(75．O％)lp5／5(100．0％) 3

4、q24-287／12(58．3％)20p12-ter4／5(80％) llql37／12(58．3％)19q12-213／5(60％) 19q12-217／12(58．3％)5p12—153／5(60％) 5p12·154／12(33．3％)21q213／5(60％) 8q4／12(33．3％)8q2／5(40％) 14q234／12(33．3％)4p132／5(40％) 20p12-te

5、r4／12(333％) 21q213／12(33．3％) 4p133／12(25％) 其中NSCLC染色體3q24-28、llql3的擴增的頻率(58．3％和583％)顯著高于SCLC(0％和O％)(p均<0．05)： NSCLC染色體缺失的部位和頻率SCLC染色體缺失的部位和頻率 2q24-375／12(58．3％)13q3／5(60％) 5q21—257／12(583％)14q32-t

6、er3／5(60％) 14q32-ter6／12(50．O％)2q24-372／5(40％) 4q344／12(333％)5q21—352／5(40％) 9q344／12(333％)9q342／5(40％) 17q3／12(25．O％)16q232／5(40％) 13q3／12(25．0％)3p1／5(20％) 16q232／12(16．7％)4q341／5(20％) 3p2／12

7、(16．7％) 21q222／12(16．7％) 但各染色體缺失頻率在NSCLC和SCLC之間無顯著差異。 結(jié)論： 1．遺傳物質(zhì)的改變在肺癌細(xì)胞中普遍存在，肺癌細(xì)胞染色體擴增和／或缺失異常比倍體異常更為常見，遺傳物質(zhì)異常是肺癌發(fā)生和發(fā)展的基礎(chǔ)。 2．無論是NSCLC還是SCLC，在其發(fā)生和發(fā)展中涉及多部位染色體(多基因)異常。 3．NSCLC和SCLC染色體擴增和缺失的發(fā)生部位和頻率有所不