流式細(xì)胞儀操作規(guī)程-sop_圖文

1、流式細(xì)胞儀操作規(guī)程目錄流式細(xì)胞儀操作規(guī)程目錄1：淋巴細(xì)胞亞群測(cè)定及絕對(duì)計(jì)數(shù)：淋巴細(xì)胞亞群測(cè)定及絕對(duì)計(jì)數(shù)2：活化淋巴細(xì)胞亞群、記憶：活化淋巴細(xì)胞亞群、記憶T及純真及純真T的檢測(cè)的檢測(cè)3：HLAB27測(cè)定測(cè)定4：CD55／CD59測(cè)定測(cè)定5：干細(xì)胞檢測(cè)和絕對(duì)計(jì)數(shù)：干細(xì)胞檢測(cè)和絕對(duì)計(jì)數(shù)6：白血病免疫分型測(cè)定：白血病免疫分型測(cè)定7：淋巴細(xì)胞：淋巴細(xì)胞T細(xì)胞亞群細(xì)胞內(nèi)因子細(xì)胞亞群細(xì)胞內(nèi)因子IFNγIL4測(cè)定測(cè)定8：細(xì)胞周期分析：細(xì)胞周期分析9：活

2、化血小板檢測(cè)：活化血小板檢測(cè)10：血小板抗體測(cè)定：血小板抗體測(cè)定11：紅細(xì)胞抗體測(cè)定：紅細(xì)胞抗體測(cè)定12：粒細(xì)胞抗體測(cè)定：粒細(xì)胞抗體測(cè)定淋巴細(xì)胞亞群測(cè)定方法方法流式細(xì)胞儀(BeckmanCoulter，貝克曼庫(kù)爾特)原理原理：雙三色四色直接免疫熒光法。熒光素標(biāo)記的各種單克隆抗體加入到全血中，與白細(xì)胞膜上相應(yīng)的抗原結(jié)合，經(jīng)過(guò)溶血、洗滌（和固定）等步驟后，在流式細(xì)胞儀上進(jìn)行分析，從而得到淋巴細(xì)胞亞群的百分?jǐn)?shù)，加入FlowCount即可得出絕

3、對(duì)計(jì)數(shù)。淋巴細(xì)胞表面抗原分布如下：T淋巴細(xì)胞：CD3；B淋巴細(xì)胞：CD3，CDl9；輔助性T淋巴細(xì)胞：CD3CD4；抑制性T淋巴細(xì)胞：CD3CD8；NK細(xì)胞：CD3CDl656等。根據(jù)淋巴細(xì)胞膜上CD分子表達(dá)的不同，流式細(xì)胞儀可以分辨出淋巴細(xì)胞及其各種不同的亞群，利用計(jì)算機(jī)軟件計(jì)算出淋巴細(xì)胞亞群的百分?jǐn)?shù)，加入FlowCount組會(huì)自動(dòng)得出絕對(duì)計(jì)數(shù)。標(biāo)本采集與處理標(biāo)本采集與處理受檢者的準(zhǔn)備受檢者的準(zhǔn)備檢查對(duì)象生活飲食處于日常狀態(tài)。采集部位

4、采集部位靜脈采血抗凝劑抗凝劑EDTA或肝素抗凝血要求要求1樣本量1ml。2樣本應(yīng)在采集后6小時(shí)內(nèi)處理，冷凍或溶血的標(biāo)本不能用。3樣本白細(xì)胞計(jì)數(shù)應(yīng)在4.010.0109L之間。若10.0109L，樣本需要稀釋，用PBS稀釋；若4.0109L，應(yīng)分離單個(gè)核細(xì)胞。試劑試劑品牌品牌劑型劑型規(guī)格規(guī)格貯存貯存貝克曼庫(kù)爾特貝克曼庫(kù)爾特成分成分1：?jiǎn)慰寺】贵w液體2—8℃(CD45483No.6607013No.6607013CD4556193No.66

5、07073No.6607073CD483No.IM1650No.IM1650同型對(duì)照IgG1IgG1IgG1No.IM1672No.IM1672CD319No.IM1293No.IM1293CD31656No.IM2076No.IM2076CD19PC5No.IM2643No.IM2643FlowCount熒光微球No.7547053No.7547053)2：全血溶血試劑(QPrep)液體(No.7546946)A：甲酸液體70ML室溫