毛果楊銨轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白PtrAMT16功能鑒定和遺傳轉(zhuǎn)化.pdf

1、氮素營(yíng)養(yǎng)對(duì)于林木的生長(zhǎng)至關(guān)重要，是有機(jī)體最主要的組成物質(zhì)之一，因此土壤中的氮素營(yíng)養(yǎng)也成為林木生長(zhǎng)發(fā)育的主要限制因素之一。同時(shí)由于糧食安全對(duì)國(guó)家繁榮與穩(wěn)定具有舉足輕重的地位，因此肥力較好的土壤一般用于農(nóng)業(yè)生產(chǎn)，營(yíng)造人工林往往選擇肥力相對(duì)較弱的區(qū)域，另外人工林也無(wú)法像農(nóng)作物一樣，進(jìn)行定期施肥，因此提高林木在貧瘠土壤中的氮素吸收與利用效率，對(duì)促進(jìn)林木在貧瘠土壤上的生長(zhǎng)具有重要意義。
　　AMT是植物體內(nèi)銨吸收和轉(zhuǎn)移的重要的轉(zhuǎn)運(yùn)子，主要從

2、事根部對(duì)于環(huán)境中銨的吸收和轉(zhuǎn)運(yùn)以及地上部分銨的重吸收。本試驗(yàn)對(duì)毛果楊銨轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白家族成員PtrAMT1;6基因進(jìn)行了表達(dá)模式、功能鑒定和遺傳轉(zhuǎn)化等研究，結(jié)果如下:
　　(1)熒光定量PCR結(jié)果顯示:PtrAMT1;6基因偏好在葉片中表達(dá)，并且在成熟葉片中的表達(dá)顯著高于幼嫩葉片;對(duì)毛果楊PtrAMT1;6基因進(jìn)行光周期定量，結(jié)果顯示，PtrAMT1;6基因具有黑暗誘導(dǎo)和光抑制的表達(dá)模式;
　　(2)酵母銨轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白突變體31019

3、b突變體功能恢復(fù)試驗(yàn)結(jié)果表明，PtrAMT1;6基因恢復(fù)了突變體高親和力銨轉(zhuǎn)運(yùn)的能力;
　　(3)用pCAMBIA-PtrAMT1;6P轉(zhuǎn)化擬南芥，并對(duì)轉(zhuǎn)化系進(jìn)行GUS染色，試驗(yàn)表明:轉(zhuǎn)化株的根莖連接部、子葉葉柄以及靠近葉柄的葉脈和葉肉可以被X-Gluc染成藍(lán)色，這表明PtrAMT1;6基因的啟動(dòng)子具有啟動(dòng)子活性;
　　(4)pROKE2-PtrAMT1;6轉(zhuǎn)化擬南芥并篩選純合子，通過(guò)幼苗在不同培養(yǎng)基上的生長(zhǎng)試驗(yàn)結(jié)果表明，P