小麥磷轉運蛋白基因的分子特征、表達及遺傳轉化.pdf

1、植物根系對磷的吸收和磷在細胞和組織間的傳輸，是通過位于細胞原生質膜上的磷轉運蛋白介導的需能主動運輸過程。本項研究針對迄今有關小麥磷轉運蛋白基因研究和報道較少的現(xiàn)狀，利用現(xiàn)代生物信息學技術和分子生物學技術，對部分小麥磷轉運蛋白的分子特征、表達特性進行較全面的研究。主要研究結果如下：
　　 1、通過在國際生物信息學網(wǎng)站進行小麥磷轉運蛋白基因查找，獲得4個尚未進行特征分析、表達和功能研究的小麥磷轉運蛋白基因，GenBank 登錄號分別

2、為AF488415、AJ830009、AY293827和AY293828。本研究依次命名為TaPT1、TaPT2、TaPT3和TaPT4。
　　 2、TaPT1～TaPT4的編碼氨基酸數(shù)量變化在467～555之間，分子量變化在57.44～60.86之間，含有在11 至14個跨膜域，以及蛋白激酶C位點和酪蛋白激酶磷酸化位點。表明TaPT1～TaPT4具有植物種屬磷轉運蛋白基因共有的結構特征。各供試小麥磷轉運蛋白基因的表達特征存在較

3、大差異。TaPT1 在正常供磷水平下，根葉中的均有表達，低磷脅迫條件下，根系中檢測不到該基因的轉錄本，而葉片中表達表現(xiàn)為隨低磷脅迫時間延長不斷增加；TaPT2和TaPT3的表達表現(xiàn)為根系特異表達的特征，隨著低磷脅迫時間延長，表達水平也不斷增強。TaPT4 在根葉及不同供磷水平下呈組成型表達特征。
　　 3、采用染色體步移技術克隆TaPT2的啟動子，克隆的啟動子全長1237 bp。分析表明，在TaPT2 啟動子的翻譯起始位點（AT

4、G）上游附近，含有轉錄調控的保守元件TATA 盒和CAAT 盒。此外，含有應答低磷脅迫逆境能力的PHO-like 元件（GACGTGG,-18 bp）。表明該PHO-like 元件可能介導了TaPT2 對低磷脅迫的應答。
　　 4、利用DNA 重組技術，構建了融合TaPT2 啟動子的雙元表達載體pCAMBIA3301-TaPT2-Gus，以及用TaPT2 不同缺失片段長度驅動報告基因Gus表達的雙元表達載體。為進一步揭示TaPT