兩個小麥MBD基因的克隆、植物表達載體的構建及遺傳轉化.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、河南農業(yè)大學碩士學位論文兩個小麥MBD基因的克隆、植物表達載體的構建及遺傳轉化姓名：劉昊英申請學位級別：碩士專業(yè)：植物資源學指導教師：孟凡榮20090501CloningofTwoMBDGenes，ConstructionofTheirPlantExpressionVectorsandGeneticTransformationwithWheatSupervisor：AssociateProfMengFanrongMasterCandid

2、ate：LiuHaoyingABSTRACT：DNAMethylationplaysimportantregulationrolesingeneexpression，cellulardifferentiationandphylogeneticdevelopmentMBDisakindoftrans—actingfactorwhichbindingwithDNAmethylation，andplayaconsiderablefunctio

3、ndruingthegrowthanddevelopmentinplantTheopenreadingframe(ORE)oftwoMBDwereisolatedbyinsilicocloningandRTPCRmethod，OverexpressionandRNAiexpressionvectorsforthemwereconstructed，andweretransformedwithwheatbythepollentubemedi

4、atedtransformationmethodsSometransgenticplantletswereconfirmedbypreliminaryidentificationThemainresultsareasfollows：1Twogeneswhichencodemethyl—CpGbindingproteinwerecloned，designatedTaMBDlandTaMBD2Sequenceanalysisshowedth

5、attheeDNAofTaMBDIis668bpinlengthandthecodingregion579bp，whichcontains36bpin5’UTRand53bpin3’UTRThegenomestructureanalysisindicatethata1386bpintronwasincludedinTaMBDlTheeDNAofTaMBD2is1427bpinlengthandthecodingregion942bp，w

6、hichcontains131bpin5’UTRand354bpin3’UTR2SequenceanalysisandBLASTXresultsrevealedthatTaMBD1andTaMBD2hadhighsimilaritytoagroupofMBDproteingenesofdifferentspeciesTaMBDlhashigheraminoacidsequencesimilaritywithMBDinrice(Acces

7、sionnumber：CT831688)，maizeMBDl01(Accessionnumber：EU976548)andArabidopsisAtMBDl(Accessionnumber：NM一1184015)were76％，74％and49％，respectivelyTaMBD2hassimilarityaminoacidswithZeamaysMBD108(Accessionnumber：AAK40309)，Arabidopsis

8、AtMBD2(Accessionnumber：NP一974850)were73％，60％，respectivelyTheinterProanalysisshowedthatthededucedaminoacidofclonedgenescontainstypicalMBDconservativeregionPhylogeneticanalysissuggestedthatthetwogenesbelongedtodifferentsub

9、classes，theTaMBD1WasincludedinIIsubclasswithAtMBD1andAtMBD4，andTaMBD2wasbelongedtoIIIsubclasswithAtMBD2，whichimpliedthattwonewMBDgeneswereislatedinwheat3TheoverexpressionandrepressionexpressionvectorsofTaMBD1andTaMBD2wer

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