2013-2014年山東省A群鏈球菌分子分型與耐藥性研究.pdf

1、[研究背景]
　　A群鏈球菌(GAS)為革蘭氏陽性菌，感染人體可引起一系列輕重不等的GAS疾病。在我國，GAS感染所致的猩紅熱一直是《中華人民共和國傳染病防治法》中規(guī)定法定報告的乙類傳染病。尤其在2011年，猩紅熱發(fā)病率明顯高于往年，引起社會各界廣泛關(guān)注。監(jiān)測GAS菌株的分子學特點對于預防與控制GAS疾病有著重要意義。
　　[研究目的]
　　1、描述2013-2014年山東省GAS分子分型特征，明確山東省GAS流行株的

2、變遷與趨勢，可為GAS疾病防治提供有力依據(jù)。
　　2、探討emm型別與超抗原基因之間的聯(lián)系。
　　3、比較各分型方法的優(yōu)劣，為合理選擇分型方法提供參考。
　　4、了解2013-2014年山東省A群鏈球菌(GAS)耐藥特征及其耐藥表型和基因型，為臨床治療GAS疾病提供依據(jù)。
　　[研究方法]
　　1、自猩紅熱、無癥狀攜帶者咽拭子中分離獲得154株GAS，利用emm分型、超抗原基因（speA、speC、speG

3、、speH、speI、speJ、smeZ、ssa、speK、speM、speL）檢測和脈沖場凝膠電泳(PFGE)對其進行分型檢測。
　　2、采用K-B紙片擴散法檢測青霉素、紅霉素、克林霉素、左氧氟沙星、四環(huán)素、氯霉素、萬古霉素、頭孢噻肟8種抗生素的耐藥情況;毛細管電泳檢測ermA、ermB、mefA、tetM、tetO共5種耐藥基因的攜帶情況;利用雙紙片法確定耐藥表型。
　　3、利用Excel2013軟件對數(shù)據(jù)進行匯總、整理

4、，采用SPSS19.0軟件進行統(tǒng)計學分析。利用辛普森指數(shù)和AW系數(shù)比較emm分型、超抗原基因譜、PFGE三種分型方法的優(yōu)劣。
　　[研究結(jié)果]
　　1、2013-2014年山東省共檢出5種emm型別，其中emm1(43.51％)和emm12(54.55％)為emm優(yōu)勢型別;包括18種emm亞型，其中emm1.0(34.72％)與emm12.0(45.83％)為的emm優(yōu)勢亞型。
　　2、peA、peB、peC、peG、

5、peHH、 speI、 speJ、 speK、 speL、 speM、 smeZ、ssa的檢出率分別為42.21％、100.00％、97.40％、98.70％、32.47％、51.95％、40.91％、0.00％、0.65％、0.65％、99.35％、98.70％。
　　3、共發(fā)現(xiàn)18種超抗原基因譜，其中以profile1(28.57％)、profile2(32.47％)、profile3(18.18％)最為常見。
　　4、

6、emm1.0、emm12.0均與speA、speH、speI、speJ的有無存在關(guān)聯(lián)性(P＜0.05)。emm1.0傾向于含有speA、speJ，且與speH、speI相斥;emm12.0則傾向于含有peH、speI，且與speA、peJ相斥。
　　5、共分出47種PFGE型別，其中PFGE16型(23.38％)與PFGE28型(12.99％)為PFGE優(yōu)勢型別。
　　6、emm分型、超抗原基因譜、PFGE(smaⅠ)三種分

7、型方法的辛普森指數(shù)分別為0.648、0.779、0.916。一致性均較低，AW PFGE(sma1）→emm分型最高，僅為0.707。
　　7、GAS對青霉素、紅霉素、克林霉素、左氧氟沙星、四環(huán)素、氯霉素、萬古霉素、頭孢噻肟的耐藥率分別為0.00％、100.00％、100.00％、0.00％、92.21％、0.00％、0.00％、0.00％。ermB、tetM陽性攜帶率分別為100.00％、99.35％，ermA、mefA、tet

8、O未檢出(0.00％)。cMLS耐藥表型占比為100.00％，未發(fā)現(xiàn)iMLS耐藥表型(0.00％)。
　　[結(jié)論]
　　1、2013-2014年山東省GAS菌株中emm型別分布較為單一，以emm1.0和emm12.0為主;超抗原基因除speK、speL、speM檢出率極低外，其余陽性攜帶率均較高，超抗原基因譜以profile1、2、3為主;PFGE型別分布呈散發(fā)狀態(tài)，PFGE16、28型為PFGE優(yōu)勢型別;耐藥以紅霉素、克林