顱咽管瘤動物模型的建立及腫瘤生物學(xué)特性的研究.pdf

1、目的 建立顱咽管瘤(CP)動物模型，研究腫瘤生物學(xué)特性，確定可預(yù)測腫瘤預(yù)后或復(fù)發(fā)的有效指標(biāo)和因子，奠定臨床治療的理論基礎(chǔ)。 方法本研究分二部分：一部分收集顱咽管瘤組織，采取異種異位移植到BALB/C裸小鼠皮下，建立腫瘤動物模型，觀察移植瘤的組織學(xué)特點，并應(yīng)用免疫組化法鑒定腫瘤性質(zhì)、測定移植瘤細胞增殖活性及血管形成能力；二部分采取前瞻性隊列研究方案，探討顱咽管瘤的生物學(xué)特性：1、光鏡及電鏡觀察各型顱咽管瘤組織結(jié)構(gòu)特征及與鄰近腦組織

2、的關(guān)系；2、應(yīng)用免疫反應(yīng)和FCM檢測腫瘤細胞增殖、侵潤活性，Ki-MCM6、Ki-S4與石蠟切片反應(yīng)測定MCM6、DNATopoⅡα蛋白表達結(jié)合FCM檢測瘤細胞DNA含量、S期分?jǐn)?shù)、G2/M+S期評價瘤細胞增殖能力。VEGF抗體、CD34與石蠟切片反應(yīng)測定VEGF蛋白表達、MVD記數(shù)判斷腫瘤侵潤性生長活性；3、光鏡下觀察HE切片腫瘤細胞形態(tài)，TUNEL法、FCM檢測瘤細胞凋亡、壞死百分?jǐn)?shù)評價腫瘤細胞壞死、凋亡情況。 結(jié)果1、將人

3、腦顱咽管瘤組織異種異位移植到BALB/C裸小鼠皮下，可以建立腫瘤動物模型，釉質(zhì)上皮型較鱗形乳頭瘤型更易存活；2、移植瘤保留了原腫瘤組織學(xué)特征，瘤細胞具有分裂增殖能力和血管形成活性；3、顱咽管瘤細胞為二倍體，釉質(zhì)上皮型較鱗形上皮型腫瘤細胞增殖活力強，前者S期分?jǐn)?shù)、G2/M+S值也顯著高于后者，類似于釉質(zhì)上皮瘤、鱗形上皮瘤復(fù)發(fā)組和非復(fù)發(fā)組比較結(jié)果；4、釉質(zhì)上皮型較鱗形乳頭瘤型更富于侵潤生長活性，血管生成能力也強于后者。但顱咽管瘤復(fù)發(fā)組與非復(fù)

4、發(fā)組比較則沒有體現(xiàn)這種差別；5、釉質(zhì)上皮型腫瘤實質(zhì)部分壞死、凋亡率小于鱗形乳頭瘤型實性成分，但二型腫瘤細胞凋亡率都極低下；6、釉質(zhì)上皮瘤較鱗形乳頭瘤易于復(fù)發(fā)； 結(jié)論本研究表明，異種異位移植可建立人腦顱咽管瘤動物模型，且移植瘤良好的保留了原腫瘤的生物學(xué)特性。顱咽管瘤細胞為二倍體，腫瘤病理類型、MCM6蛋白、DNATopoⅡα蛋白、S期分?jǐn)?shù)、G2/M+S值與腫瘤預(yù)后和復(fù)發(fā)有關(guān)，可能預(yù)測腫瘤復(fù)發(fā)危險性，但VEGF、MVD卻在腫瘤復(fù)發(fā)組