海帶（Laminaria）養(yǎng)殖品種遺傳多樣性的RAPD分析.pdf

1、本研究以四個海帶(Laminaria)養(yǎng)殖群體為研究對象，采用RAPD分子標(biāo)記技術(shù)對四個群體的遺傳結(jié)構(gòu)進(jìn)行了研究，分析了各群體內(nèi)的遺傳變異、遺傳多樣性，以及四個群體間的遺傳分化。主要結(jié)果如下： 對分別用SDS法、常規(guī)CTAB法、改良CTAB法三種方法提取的海帶基因組DNA，進(jìn)行紫外吸收檢測、電泳檢測和RAPD擴(kuò)增檢測。結(jié)果表明除SDS法外，其余兩種方法均可獲得完整的海帶基因組DNA，RAPD擴(kuò)增譜帶清晰穩(wěn)定。尤以改良CTAB法提

2、取的DNA質(zhì)量較好。 對海帶RAPD-PCR條件進(jìn)行了優(yōu)化。優(yōu)化條件為：(1)每一反應(yīng)體系總體積25μL，含2.5μL10×buffer，40ngDNA模板，0.25μM引物，2.5mMMgCI2，0.2mMdNTP，1UTaq酶；(2)擴(kuò)增程序：94℃，5min→[94℃，1min→37℃，1min→72℃，2min]×40→72℃，10min。 17個RAPD隨機(jī)引物對每個群體各20個海帶樣本的基因組DNA進(jìn)行了擴(kuò)增

3、，共獲得136個重復(fù)性好且譜帶清晰的RAPD標(biāo)記，片斷大小在0.2-1.5kb之間，四個群體的多態(tài)位點(diǎn)比例在39.71％-50.00％之間，Nei基因多樣性指數(shù)在0.1728-0.2312之間，Shanoon多樣性指數(shù)在0.2481-0.3270之間。其中對照群體遺傳多樣性水平最高，本牛群體、榮福群體次之，而福建群體最低。總體上，群體內(nèi)個體間遺傳差異明顯，四個群體的遺傳多樣性水平較高。利用Shannon多樣性指數(shù)和Nei多樣性指數(shù)估算群