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1、福建師范大學(xué)碩士學(xué)位論文樟樹居群遺傳多樣性及遺傳結(jié)構(gòu)的RAPD分析姓名:潘曉華申請學(xué)位級別:碩士專業(yè):植物學(xué)指導(dǎo)教師:朱錦懋黃儒珠20040401AbstractThegeneticdiversityandgeneticstructureofCinnanlonffllCamphora(L)PreslpopulationwerestudiedbyrandomamplifiedpolymorphicDNA(RAPD)Thesiswascom
2、posedof4parts:1BasedontheconventionaICTABmethodanefficientprocedurewasdevelopedThemajorimprovementincludedeliminationaIotofsecondarymetaboIitessuchaspolyphenolsetcandcollectionofnucleibeforefreeDNAThen3CTABbuf艷rwhichcons
3、istedof100mrnollLTris(PH8∞,25mmol/LEDTA15mol/LNaCI,30%C11ABwasaddedtoextracttotaIDNATheresultsfromratiosofA260andA2so,electrophoresis,digestionwithrestrictionendonueleasesandPCRamplificationsuggestedthatisolatedDNAwassui
4、tableforRAPDanalysis2ApreservativemediumwhichconsistedofsaturatedNaCl一C1AB2%(w:VPVP2%(V:V)8一sulthydrylethanol,50mmol/LEDTA(pH8o),wasappliedtofieldpreservationofleavestissueforDNApreparationofCCamphoraItwasindicatedthatth
5、eisolatedDNAfromtheleavestissuepreservedinthemediumfor7d、14dwassimilartothatfromfreshleavestissue3EfrectsofthecontentofDNAtemplateprimerdNTPMg“andTaqDNApolymerase011experimentalresultweretestedbyuniformtestdesign。andtheo
6、ptimalreactionsystemofRAPDforCCamphoraWasdetemainedas協(xié)llows:8ng/uLDNAtemplate,02umol/Lprimer,02mmol/LdNTP,15mmol/LMgCIzandlU7bqDNA,polymeraseintotal20pLreactionvolumeEffectsot’thedenaturationtimeandannealingtemperatureon
7、experimentalresultweretestedaswellTheoptimalamplificationprocedureconditionswere:180sat94℃30sat94℃,90sat35℃,120sat72℃,cycling42times300sat72℃,thenstoredat4℃4111egeneticdiversityandgeneticstructureofCCamphorapopulationwer
8、estudiedbyRAPDneanalysisdataof168RAPDlOCiof2lrandomprimersindicatedthatleveIofgeneticvariabilityinthe68samplesfrom7populationsinFujianwasnothighThenumberofpolymorphicbandswas75Thepercentageofpolymorphicbands(PPB)was4464%
9、ThegeneticdiversityofShaowupopulation(SW)Wasthehighest,whichPPBwas3333%AndFujianAcadenryofForestrypopulation(vs)wasthelowest,whichPPBwas2262%Asanalyzedbypopulationgeneticanalysis(POPGENE)132,Shannon’SInformationindex,Nei
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