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1、研究蚴:嬲翩獺務(wù)嗯級(jí)學(xué)院紫蠢1疑:年、1月:日河北醫(yī)科大學(xué)研究生學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)性聲明本論文是在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果,除了文中特別加以標(biāo)注等內(nèi)容外,文中不包含其他人己發(fā)表或撰寫的研究成果,指導(dǎo)教師對(duì)此進(jìn)行了審定。本論文由本人獨(dú)立撰寫,文責(zé)自負(fù)。研究生簽名:書旃磚翩臻曾霈坤中文摘要黑色素瘤抗原M_AGEA在乳腺癌患者腫瘤組織及外周血中的表達(dá)及意義摘要腫瘤是困擾人類健康的重大疾病。由于腫瘤的生物學(xué)特征的高度復(fù)雜性、多樣性和可
2、變性,認(rèn)識(shí)腫瘤發(fā)生發(fā)展機(jī)制和尋找治療腫瘤方法成為遏制腫瘤面臨的巨大挑戰(zhàn)。隨著人們對(duì)腫瘤與宿主的關(guān)系,特別是機(jī)體抗腫瘤免疫應(yīng)答及腫瘤免疫逃逸機(jī)制的認(rèn)識(shí)不斷深入,將以免疫細(xì)胞、分子、基因?yàn)榛A(chǔ)的干預(yù)手段應(yīng)用于腫瘤治療成為腫瘤防治研究的重大熱點(diǎn)。腫瘤免疫治療成為繼外科手術(shù)、放療、化療之后第四類被證明具有顯著臨床治療效果及優(yōu)勢(shì)的抗腫瘤療法。近年的研究顯示,黑色素瘤抗原基因(melanomaantigengene,MAGE)因其獨(dú)特的表達(dá)模式,而
3、被認(rèn)為是腫瘤免疫治療理想的靶分子。本課題組一直致力于MAGE—A家族在乳腺癌中表達(dá)意義的研究。本研究通過(guò)制備MAGE—A家族成員MAGEA9、A1l單克隆抗體(monoclonalantibodymAb),利用自锘lJmAb分別檢測(cè)MAGEA9、A11在乳腺癌組織及相應(yīng)癌旁正常乳腺組織中的表達(dá),分析其表達(dá)與乳腺癌臨床生物學(xué)指標(biāo)之間的相關(guān)性。并通過(guò)多重巢式RTPCR(MultiplenestedRTPCR)檢測(cè)MAGEA基因在乳腺癌外周血
4、中的mRNA水平,從而為MAGEA家族成為乳腺癌預(yù)后監(jiān)測(cè)的特異性指標(biāo)提供理論依據(jù)。主要研究?jī)?nèi)容和結(jié)果如下:第一部分利用自制MAGEA9、All單克隆抗體檢測(cè)MAGEA9和All在乳腺癌組織中表達(dá)及臨床意義目的:應(yīng)用自制MAGEA9、一A11單克隆抗體檢測(cè)MAGEA9和All在乳腺癌組織中的表達(dá)情況,探討其表達(dá)的臨床意義及成為乳腺癌潛在治療靶點(diǎn)的可能性。方法:1利用抗原表位篩選、表達(dá)載體構(gòu)建、陽(yáng)性克隆鑒定、陽(yáng)性克隆質(zhì)粒提取及轉(zhuǎn)化、誘導(dǎo)表達(dá)
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