2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、目的
  腎細胞癌(Renalcellcarcinoma,RCC)占男性新發(fā)癌癥的4%,在女性新發(fā)癌癥病例中占3%,與其他實體腫瘤不同的是,腎癌對腫瘤的傳統(tǒng)療法均不敏感,如放射治療、化學(xué)治療等.但是腎癌被發(fā)現(xiàn)是免疫相關(guān)的腫瘤,多種免疫治療在腎癌的治療中取得了不同程度的成功。本實驗通過研究過繼細胞免疫治療(Adoptivecellularimmunotherapy,ACI):異體抗CD3分子的單克隆抗體激活的殺傷細胞(anti-CD

2、3monoclonalantibodyactivatedkillercells,CD3AK)對人腎癌細胞株OS-RC-2的體外殺傷作用,以及其對嚴重聯(lián)合免疫缺陷(severecombinedimmunodeficiency,SCID)小鼠人腎癌移植瘤模型的體內(nèi)抑制作用,從而進一步探討異體CD3AK細胞對SCID小鼠人腎癌移植瘤治療的有效性,為異體CD3AK細胞治療腎癌的臨床應(yīng)用提供理論及實驗支持。
  方法
  1.人腎癌O

3、S-RC-2細胞株的培養(yǎng)與傳代:無菌細胞培養(yǎng),及時進行換液與傳代,定時觀察細胞形態(tài)與數(shù)量,待細胞進入對數(shù)生長期時,臺盼藍染色鑒定活力后用于實驗。
  2.于體外條件下建立大量擴增異體CD3AK細胞的培養(yǎng)體系:采集健康志愿者的外周血,體外分離獲得外周血單個核細胞(peripheralbloodmononuclearcell,PBMC),培養(yǎng)獲得異體CD3AK細胞;采用流式細胞儀檢測CD3AK細胞的表型;
  3.CCK-8(C

4、ellCountingKit-8)法檢測異體CD3AK細胞對人腎癌OS-RC-2細胞株的殺傷作用;
  4.建立荷瘤模型:采用左側(cè)腹股溝皮下注射的方法,建立人腎癌SCID鼠皮下移植瘤模型,并通過尾靜脈注射異體CD3AK細胞,對照組尾靜脈注射磷酸鹽緩沖液(phosphatebuffersolution,PBS),劑量為0.2ml/只,觀察小鼠的生物學(xué)特征。SCID小鼠被隨機分為四組(n=8):A組(于荷瘤前尾靜脈注射異體CD3AK細

5、胞),B組(A組對照組:荷瘤前尾靜脈注射PBS);C組(荷瘤后尾靜脈注射異體CD3AK細胞),D組(C組對照組:荷瘤后尾靜脈注射PBS)。隔日測量小鼠的體重、腫瘤體積以觀察小鼠體重及腫瘤生長變化;末次治療結(jié)束后24小時處死小鼠,無菌取脾臟、腫瘤組織用于后續(xù)實驗。
  5.免疫組化法檢測CD3+細胞在小鼠腫瘤組織中的表達情況;計算脾臟指數(shù)(脾重/體重),觀察異體CD3AK細胞對腎腫瘤生長的抑制作用及其對小鼠免疫系統(tǒng)的作用。
 

6、 結(jié)果
  1.將異體CD3AK細胞與人腎癌OS-RC-2細胞共同孵育12h,用CCK-8法檢測可以觀察到,隨著效應(yīng)細胞與靶細胞比值的增大,異體CD3AK細胞對OS-RC-2細胞的殺傷活性隨之增高。
  2.A、C組小鼠與其對照組B、D組小鼠比較,A、C組小鼠的脾臟指數(shù)顯著增大(P<0.05);A組與C組比較,小鼠脾臟指數(shù)無明顯差異(P>0.05);
  3.A、C組小鼠與其對照組B、D組小鼠比較,A、C組小鼠腫瘤重量

7、顯著減小,腫瘤生長緩慢(P<0.05);A、C組與B、D組小鼠體重均增加,實驗(A、C)組小鼠體重較其對照(B、D)組小鼠體重增加的少(P<0.05),
  4.A組小鼠與C組小鼠比較,A組小鼠腫瘤重量減小,腫瘤生長遲緩(P<0.05)。
  5.免疫組化方法示,CD3+細胞在C組小鼠腫瘤組織中有陽性表達,其余各組小鼠腫瘤組織未發(fā)現(xiàn)有陽性表達。
  結(jié)論
  1.異體CD3AK細胞對人腎癌OS-RC-2細胞株具有

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