人γδT細胞、CD3AK細胞和NK細胞聯(lián)合治療對裸鼠移植人結(jié)腸癌療效觀察.pdf

1、目的：探討人γδT細胞、CD3AK細胞和NK細胞聯(lián)合治療對裸鼠移植人結(jié)腸癌的免疫治療效果及可能的機制。
　　方法：用人結(jié)腸癌細胞株(SW-1116)接種于48只BALC/c裸鼠皮下，建立人結(jié)腸癌裸鼠模型。將裸鼠隨機分為4組，每組12只，A組：尾靜脈注射1640培養(yǎng)液；B組：注射NK細胞+γδT細胞；C組：注射NK細胞+CD3AK細胞；D組：注射NK細胞+CD3AK細胞+γδT細胞。設(shè)定建模成功并分組為第1天，分別于第1天、第4天、

2、第7天每組給予相應的治療。于第10天每組隨機選取6只裸鼠處死，測量腫瘤體積大小，取部分腫瘤活組織用流式細胞儀檢測瘤體內(nèi)免疫細胞浸潤情況，Western-blot檢測腫瘤組織內(nèi)bax蛋白及bcl-2蛋白的表達，其余瘤組織放入福爾馬林溶液中固定，用TUNEL法檢測腫瘤細胞凋亡率。剩余的6只裸鼠繼續(xù)飼養(yǎng)，以觀察其一般狀態(tài)，生存時間。
　　結(jié)果：接種后第4天，移植瘤最大徑均達2mm，成功率100％。在第一次治療后10d時，A、B、C、D組

3、平均腫瘤體積分別為86.78±7.19、52.80±5.59、54.05±6.53和43.16±7.40mm3，治療組與對照組比較，有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，B、C組組間無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，D組與B、C組比較有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。A、B、C、D組的生存時間分別為25.84±2.17、31.53±2.58、31.71±2.67、37.99±5.11天，治療組與對照組比較，有統(tǒng)計學意義(p<0.05)，B、C組組間無統(tǒng)

4、計學意義(P>0.05)，D組與B、C組有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。治療組瘤體內(nèi)均有免疫細胞浸潤。TUNEL檢測結(jié)果顯示，與對照組相比，治療組癌細胞的凋亡率均升高，有統(tǒng)計學意義(p<0.05)，以D組升高最為明顯(P<0.05)。Western-blot檢測顯示治療組瘤體內(nèi)bax蛋白表達升高(P<0.05)，bcl-2蛋白表達降低(P<0.05)。
　　結(jié)論：人γδT細胞、CD3AK細胞和NK細胞聯(lián)合治療可延緩裸鼠移植的人結(jié)腸癌