人γδT細(xì)胞、CD3AK細(xì)胞和NK細(xì)胞聯(lián)合治療對(duì)裸鼠移植人結(jié)腸癌療效觀察.pdf

1、目的：探討人γδT細(xì)胞、CD3AK細(xì)胞和NK細(xì)胞聯(lián)合治療對(duì)裸鼠移植人結(jié)腸癌的免疫治療效果及可能的機(jī)制。
　　方法：用人結(jié)腸癌細(xì)胞株(SW-1116)接種于48只BALC/c裸鼠皮下，建立人結(jié)腸癌裸鼠模型。將裸鼠隨機(jī)分為4組，每組12只，A組：尾靜脈注射1640培養(yǎng)液；B組：注射NK細(xì)胞+γδT細(xì)胞；C組：注射NK細(xì)胞+CD3AK細(xì)胞；D組：注射NK細(xì)胞+CD3AK細(xì)胞+γδT細(xì)胞。設(shè)定建模成功并分組為第1天，分別于第1天、第4天、

2、第7天每組給予相應(yīng)的治療。于第10天每組隨機(jī)選取6只裸鼠處死，測(cè)量腫瘤體積大小，取部分腫瘤活組織用流式細(xì)胞儀檢測(cè)瘤體內(nèi)免疫細(xì)胞浸潤情況，Western-blot檢測(cè)腫瘤組織內(nèi)bax蛋白及bcl-2蛋白的表達(dá)，其余瘤組織放入福爾馬林溶液中固定，用TUNEL法檢測(cè)腫瘤細(xì)胞凋亡率。剩余的6只裸鼠繼續(xù)飼養(yǎng)，以觀察其一般狀態(tài)，生存時(shí)間。
　　結(jié)果：接種后第4天，移植瘤最大徑均達(dá)2mm，成功率100％。在第一次治療后10d時(shí)，A、B、C、D組

3、平均腫瘤體積分別為86.78±7.19、52.80±5.59、54.05±6.53和43.16±7.40mm3，治療組與對(duì)照組比較，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，B、C組組間無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，D組與B、C組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。A、B、C、D組的生存時(shí)間分別為25.84±2.17、31.53±2.58、31.71±2.67、37.99±5.11天，治療組與對(duì)照組比較，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05)，B、C組組間無統(tǒng)

4、計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，D組與B、C組有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。治療組瘤體內(nèi)均有免疫細(xì)胞浸潤。TUNEL檢測(cè)結(jié)果顯示，與對(duì)照組相比，治療組癌細(xì)胞的凋亡率均升高，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05)，以D組升高最為明顯(P<0.05)。Western-blot檢測(cè)顯示治療組瘤體內(nèi)bax蛋白表達(dá)升高(P<0.05)，bcl-2蛋白表達(dá)降低(P<0.05)。
　　結(jié)論：人γδT細(xì)胞、CD3AK細(xì)胞和NK細(xì)胞聯(lián)合治療可延緩裸鼠移植的人結(jié)腸癌