阿爾茨海默病與路易體癡呆患者腦脊液生物標(biāo)記物的研究.pdf

1、背景：
　　癡呆疾病已成為嚴(yán)重的公共衛(wèi)生問題，不但嚴(yán)重影響老年人的晚年生活，并且給患者家屬及社會帶來沉重的心理和經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。其中阿爾茨海默?。ˋD）是中樞神經(jīng)系統(tǒng)常見的進(jìn)展性神經(jīng)退行性癡呆疾病，是伴有腦部特殊病理生理改變的一種獲得性、持續(xù)性及全面性認(rèn)知功能障礙的臨床綜合征。路易體癡呆（DLB）是一種神經(jīng)系統(tǒng)變性疾病，發(fā)病率在老年人群僅次于AD。錯誤折疊的蛋白在大腦中沉積的過程是AD與DLB最主要的病理改變，蛋白的沉積可引起廣泛的毒性

2、和炎性損傷，從而引起大腦功能不全和突觸功能障礙。AD的主要病理特征除了神經(jīng)元的凋亡和突觸的減少，還包括胞體內(nèi)由高度磷酸化的tau組成的神經(jīng)原纖維纏結(jié)（NFTs），以及胞體外由β-淀粉樣蛋白（Aβ）沉積形成的老年斑（SPs）。DLB特征性病理改變是在杏仁核、內(nèi)嗅皮層、新皮層及腦干等部位廣泛分布的路易小體（LBs）及路易軸突（LNs）。該病理改變是由α-突觸核蛋白（α-synuclein）異常聚集，并與異常代謝的脂質(zhì)分子共同作用而形成。目前

3、AD與DLB的分類診斷主要依靠臨床觀察及量表，但仍存在遺漏和評價欠準(zhǔn)確的缺點(diǎn)，因此需要特異性及敏感性較高的客觀指標(biāo)。生物標(biāo)記物在DLB與AD的診斷和鑒別診斷中起著重要的作用。t-tau、p-tau181P、Aβ1-42及α-synuclein已分別公認(rèn)為AD及DLB重要的病理生物標(biāo)記物。腦脊液與腦細(xì)胞間隙直接聯(lián)通，所以對腦脊液中病理改變的相應(yīng)化學(xué)成分的檢測可直接反映大腦的病理改變，具有經(jīng)濟(jì)易行，安全可靠的特點(diǎn)，是理想的檢測途徑。而鈣穩(wěn)態(tài)

4、失衡是神經(jīng)變性改變及認(rèn)知損害的重要病因，視錐蛋白樣蛋白-1（VILIP-1）作為一種神經(jīng)鈣傳感蛋白，與鈣離子所致的腦部損傷密切相關(guān)，已經(jīng)通過腦損傷模型的大規(guī)模基因測序分析被確認(rèn)為神經(jīng)損傷標(biāo)記物。與特異性較強(qiáng)的腦脊液病理標(biāo)記物不同，腦脊液中的VILIP-1被認(rèn)為更直接的與腦部損傷程度相關(guān)，并且可以更好的反映認(rèn)知損害程度。研究顯示腦脊液中的VILIP-1異常升高并具有識別AD的臨床應(yīng)用價值，因此腦脊液VILIP-1被認(rèn)為是AD的新型生物標(biāo)記

5、物。
　　目的：
　　本研究的主要目的是探討AD與DLB患者腦脊液中的各生物標(biāo)記物（包括神經(jīng)損傷標(biāo)記物 VILIP-1及已確定的病理生物標(biāo)記物 t-tau、tau181P、Aβ1-42及α-synuclein）的濃度改變模式，及以上生物標(biāo)記物腦脊液濃度在AD的診斷及AD與DLB鑒別診斷中的應(yīng)用效能。
　　方法：
　　本研究共納入32例DLB患者、61例AD患者和40例對照者，行腰椎穿刺術(shù)收集腦脊液樣品。應(yīng)用簡易智

6、能狀態(tài)量表（MMSE）、蒙特利爾認(rèn)知評估量表（MoCA）、臨床癡呆評定量表（CDR）、日常生活能力量表（ADL）和神經(jīng)精神癥狀問卷（NPI）評定患者認(rèn)知功能及精神行為癥狀。腦脊液中VILIP-1、t-tau、p-tau181P、Aβ1-42及α-Synuclein的濃度均使用商品化的ELISA試劑盒檢測。
　　結(jié)果：
　?。?）各腦脊液蛋白濃度改變模式：AD患者腦脊液中的 VILIP-1，t-tau和p-tau181P濃度顯

7、著高于DLB組及健康對照組（P<0.001），DLB組與健康對照組無顯著差異（P>0.05）；DLB與AD患者的腦脊液中的Aβ1-42濃度顯著低于健康對照組（P<0.001）；DLB組的腦脊液中的α-synuclein濃度顯著低于AD組及健康對照組（P<0.001）。
　?。?）AD組的ε4基因攜帶者頻率較DLB（P=0.002）及健康對照組（P=0.006）顯著升高，DLB組與健康對照組無統(tǒng)計學(xué)差異（P=0.744），且AD組的

8、ε4基因攜帶者腦脊液Aβ1-42濃度顯著下降（P=0.026）。（3）各蛋白及比值的診斷效用：在區(qū)分AD與健康對照者時，腦脊液中的VILIP-1具有較好的診斷準(zhǔn)確率（AUC=0.902，P<0.001）。而VILIP-1/Aβ1-42的比值較單獨(dú)使用VILIP-1時的診斷準(zhǔn)確率更高（AUC=0.997，P<0.001），最佳敏感度為98.4％，特異度為97.5%。在AD的診斷中使用生物標(biāo)記物濃度的比值（VILIP-1/Aβ1-42、t-

9、tau/Aβ1-42及 p-tau181P/Aβ1-42）可以增加診斷的準(zhǔn)確率、敏感度及特異度。在鑒別診斷AD與DLB時，腦脊液中的VILIP-1、t-tau、p-tau181P及α-synuclein也具有一定的診斷準(zhǔn)確率（AUC為0.788～0.894，均P<0.05），而使用VILIP-1/Aβ1-42、t-tau/Aβ1-42及p-tau181P/Aβ1-42比值的AUC分別為0.752～0.849。與單獨(dú)使用各生物標(biāo)記物相比，

10、在鑒別診斷AD與DLB時使用生物標(biāo)記物濃度的比值（VILIP-1/Aβ1-42、t-tau/Aβ1-42及p-tau181P/Aβ1-42）未能增加診斷的準(zhǔn)確率。
　?。?）腦脊液中的VILIP-1與 t-tau、p-tau181P在AD、DLB及健康對照組有顯著正相關(guān)（均P<0.05）。腦脊液中的VILIP-1與腦脊液α-synuclein在AD及健康對照組有顯著正相關(guān)。腦脊液中的t-tau與p-tau181P濃度在AD、DLB

11、及健康對照組有顯著正相關(guān)（P<0.05）。
　　結(jié)論
　?。?）本研究中的AD患者具有典型的腦脊液tau及Aβ濃度改變模式，并且伴有載脂蛋白E（apolipoprotein，ApoE）ε4基因頻率的升高。而DLB患者的腦脊液α-synuclein濃度明顯降低，是本研究中DLB患者的特征性改變。神經(jīng)損傷標(biāo)記物VILIP-1在AD患者腦脊液中異常升高，并且在AD與DLB的鑒別診斷中顯示出與t-tau、p-tau181P及α-sy

12、nuclein相近的診斷效能，因此腦脊液VILIP-1在AD與DLB的鑒別診斷中具有一定的應(yīng)用價值。
　?。?）在AD患者與健康對照者鑒別時，腦脊液VILIP-1/Aβ1-42比值的總體診斷準(zhǔn)確率、敏感度和特異度均明顯高于單獨(dú)使用生物標(biāo)記物的診斷效能，提示聯(lián)合使用生物標(biāo)記物在區(qū)別AD與健康人群時具有非常顯著的應(yīng)用價值。
　　（3）在AD與DLB患者的鑒別診斷中，使用腦脊液中的VILIP-1濃度或VILIP-1/Aβ1-42的

13、比值作為鑒別診斷的指標(biāo)，雖然仍然具有較好的總體診斷準(zhǔn)確率，但敏感度及特異度仍未能滿足臨床所需的敏感度特異度均大于85%的建議標(biāo)準(zhǔn)。AD與DLB復(fù)雜的蛋白相互協(xié)調(diào)作用可導(dǎo)致兩者在病理改變上的重疊及最終影響腦脊液濃度的診斷效能。
　?。?）隨著病程的進(jìn)展，DLB與AD的病理改變可能趨向同化，提示早期檢測腦脊液生物標(biāo)記物具有非常重要的意義?？紤]到AD與DLB的異質(zhì)性，探索腦脊液中的VILIP-1、t-tau、p-tau181P、Aβ1-