肺心湯含藥血清對離體培養(yǎng)的大鼠肺動脈平滑肌細胞增殖和低氧誘導因子脯氨酸羥化酶的影響.pdf

1、【目的】研究肺心湯含藥血清對體外缺氧環(huán)境下大鼠原代肺動脈平滑肌細胞中PHDs-HIF-1α信號分子表達的影響，探索肺心湯含藥血清與對缺氧下大鼠肺動脈平滑肌細胞增殖的關(guān)系。
　　【方法】細胞增殖部分：組織貼壁法培養(yǎng)大鼠原代肺動脈平滑肌細胞，MTT法、EDU標記法檢測不同濃度FXD含藥血清對缺氧處理（1％O2、94%N2和5%CO2）24h后大鼠PAMSC增殖情況。基因表達部分：Western-blot檢測不同缺氧時間（2h、4h、6

2、h、12h、24h）下HIF-1α的蛋白表達；選用HIF-1α表達量最高一組的時間點作為后續(xù)時間點檢測常氧組、缺氧模型組、缺氧+FXD含藥血清組，缺氧+硝苯地平組PHDs、HIF-1α蛋白和mRNA的表達。
　　【結(jié)果】
　　1.肺心湯含藥血清可抑制體外缺氧處理24h后大鼠PASMC的增殖，且呈劑量依賴性。
　　2.不同缺氧時間點對HIF-1α蛋白表達的影響 Western Blot結(jié)果顯示：隨著缺氧時間的延長，HIF

3、-1α的蛋白表達量呈遞增趨勢，缺氧12h組達到高峰值，高于缺氧2h組（P＜0.05），缺氧24h組維持高水平。
　　3.缺氧處理12h對大鼠PASMC中HIF-1α、PHDs蛋白表達的影響 Western Blot結(jié)果顯示：與正常對照組比較，缺氧模型組、缺氧+FXD組、缺氧+硝苯地平組HIF-1a、PHD3蛋白表達水平明顯增加（P＜0.01）。
　　4.缺氧處理12h對大鼠PASMC中HIF-1α、PHDs mRNA表達的影

4、響 RT-PCR結(jié)果顯示：與正常對照組比較，缺氧模型組HIF-1a、PHD2、PHD3 mRNA表達水平明顯增加（P＜0.01）。
　　5.肺心湯含藥血清對缺氧處理12h大鼠PASMC中HIF-1α、PHDs蛋白表達的影響Western Blot結(jié)果顯示：與缺氧模型組相比：缺氧+FXD組HIF-1α蛋白表達水平增加（P＜0.05），缺氧+FXD組PHD1蛋白表達水平明顯增加（P＜0.01）。
　　6.肺心湯含藥血清對大鼠PA

5、SMC中HIF-1α、PHDs mRNA表達的影響 RT-PCR結(jié)果顯示：與缺氧模型組相比，缺氧+FXD組和缺氧+西藥組PHD1 mRNA表達升高（P＜0.05）。
　　7.【結(jié)論】
　　1.肺心湯含藥血清可抑制體外缺氧處理24h大鼠PASMC的增殖；
　　2.肺心湯含藥血清能抑制缺氧處理12h大鼠PASMC中HIF-1α蛋白的表達，但能提高PHD1蛋白和mRNA水平的表達；
　　3.缺氧12h狀態(tài)下，肺心湯含藥