Nogo基因及其信號(hào)通路蛋白在小鼠耳蝸表達(dá)的初步研究.pdf

1、目的:通過(guò)觀察Nogo基因轉(zhuǎn)錄體Nogo-A、Nogo-B和Nogo-C，及Nogo各信號(hào)通路關(guān)鍵蛋白質(zhì)在小鼠耳蝸的表達(dá)情況，探討Nogo基因在小鼠耳蝸表達(dá)的主要轉(zhuǎn)錄體和主要信號(hào)通路。
　　方法:將小鼠分為出生后3天、7天、2周、4周、8周共5組，取耳蝸，Trizol法提取RNA，后逆轉(zhuǎn)錄合成cDNA，然后行熒光定量PCR擴(kuò)增Nogo的三個(gè)轉(zhuǎn)錄體Nogo-A、Nogo-B和Nogo-C，及Nogo受體NgR、PirB、GPR50和

2、Nogo氨基端整合素α4、αv、α5。根據(jù)PCR結(jié)果，對(duì)Nogo基因各轉(zhuǎn)錄體及其受體和氨基端整合素這些信號(hào)通路關(guān)鍵蛋白質(zhì)在出生后不同齡小鼠耳蝸的表達(dá)進(jìn)行相對(duì)定量分析。
　　結(jié)果:1.Nogo三個(gè)轉(zhuǎn)錄體在小鼠耳蝸均有mRNA水平表達(dá)，比較在3天組耳蝸表達(dá)量的相對(duì)值，Nogo-A（0.185±0.0070）、Nogo-B（0.175±0.0060）的表達(dá)量明顯高于Nogo-C（0.011±0.0010）(P＜0.05)。比較在各年齡組

3、，Nogo-A在3天組耳蝸（0.185±0.0070）顯著高于7天組（0.046±0.0025）(P＜0.05)，3天組和7天組顯著高于2周組（0.011±0.001）、4周組（0.010±0.0009）、8周組（0.009±0.0008）(P＜0.05)，而在后3個(gè)組耳蝸的表達(dá)無(wú)明顯差異(P＞0.05)。Nogo-B在3天組耳蝸（0.175±0.0060）顯著高于7天組（0.040±0.0018）(P＜0.05)，3天組和7天組顯著高

4、于在2周組（0.010±0.0010）、4周組（0.009±0.0008）、8周組（0.009±0.0009）(P＜0.05)，后3個(gè)組的表達(dá)量無(wú)明顯差異(P＞0.05)。Nogo-A和Nogo-B在小鼠耳蝸的表達(dá)隨著出生后年齡的增長(zhǎng)，表達(dá)水平逐漸降低，到2周時(shí)表達(dá)水平基本穩(wěn)定。Nogo-C在3天組耳蝸表達(dá)量(0.011±0.0001)與7天組(0.010±0.0008)、2周組（0.009±0.0007）、4周組（0.010±0.00

5、07）、8周組（0.010±0.0008）的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　　2.Nogo的三個(gè)受體蛋白NgR、PirB、GPR50及氨基端整合素α4、αv、α5在小鼠耳蝸均表達(dá)，比較在3天組耳蝸的表達(dá)，NgR（0.011±0.0010）、PirB(0.010±0.0008)、GPR50(0.009±0.0008)、α4(0.011±0.0009)、αv（0.009±0.0007）、α5（0.008±0.0006）的表達(dá)相互