不同抗性曬煙品種接種TMV后抗氧化酶活性變化及N基因分子標(biāo)記抗性鑒定.pdf

1、本研究以25份煙草品種為試材，進(jìn)行了煙草花葉病毒（TMV）人工接種試驗(yàn)，鑒定25份煙草品種TMV抗性程度，且選擇具有代表性的免疫（延曬十號(hào)）、抗?。▔瘟謺駸煟⒅懈校ㄑ訒袼奶?hào)）品種為試材，研究了接種前后的保護(hù)酶活性變化規(guī)律。以吉煙九號(hào)DNA為模板，選用一對(duì)N基因特異性引物，采用25μL PCR反應(yīng)體系，對(duì)影響 N基因的PCR反應(yīng)體系的主要因子進(jìn)行單因素優(yōu)化試驗(yàn)，用所優(yōu)化的體系對(duì)25個(gè)煙草品種進(jìn)行PCR擴(kuò)增，并結(jié)合25個(gè)煙草品種的人工接種

2、抗性鑒定結(jié)果，驗(yàn)證體系的穩(wěn)定性和可靠性。主要研究結(jié)果如下：延曬五號(hào)、B7、8107等9份材料為T(mén)MV免疫品種；壩林曬煙為T(mén)MV抗病品種；小馬稀、延吉千層塔、建平大蘭花煙等6份材料為T(mén)MV中抗品種；大馬稀、自來(lái)紅、云煙87等8份材料為T(mén)MV中感品種；G140為T(mén)MV感病品種。在超氧化物歧化酶（SOD）、過(guò)氧化物酶（POD）和過(guò)氧化氫酶（CAT）活性表現(xiàn)上，隨接種時(shí)間的推進(jìn)，三個(gè)對(duì)照處理的酶活性均逐漸上升，三個(gè)接種處理則呈先上升后下降的趨勢(shì)

3、；接種后6-24d，三個(gè)品種接種處理均比對(duì)照處理高，增加幅度最大的是延曬十號(hào)，最小的是延曬四號(hào)；接種后36d，三個(gè)接種處理均低于對(duì)照，降低幅度由小到大依次為延曬十號(hào)、壩林曬煙、延曬四號(hào)。曬煙N基因PCR最適反應(yīng)條件為25μL體系中含20ng/μL模板DNA；0.20μmol/L引物；1.5mmol/L Mg2+；0.20mmol/L dNTPs；1.0 U Taq酶。由分子鑒定和人工鑒定結(jié)果可知，凡能擴(kuò)增出特異條帶的品種，其人工抗性鑒定