大白菜根腫病抗性基因分子標(biāo)記與定位.pdf

1、大白菜的植物學(xué)分類為十字花科蕓薹屬，起源于中國，由于其豐富的營養(yǎng)價值和廣泛的生態(tài)栽培類型，在我國得到廣泛的種植。根腫病是由蕓薹根腫菌（PlasmodiophorabrassicaeWoron.）寄生而引起的一種土傳病害，在世界范圍內(nèi)危害程度大且危害面積大。由于根腫菌是專性寄生在十字花科作物上，因此極大地威脅著十字花科作物的生產(chǎn)。大白菜栽培周期長，抗病品種少，因此與其他蔬菜如小白菜、日本蕪菁、生菜等相比也極易受到根腫病的危害。根腫病目前在

2、世界很多國家都發(fā)生已久且普遍嚴(yán)重，我國大白菜栽培面積大，遭受根腫病危害的程度也隨之較大.因此選育抗根腫病的大白菜優(yōu)良品種是當(dāng)前最亟待解決的問題。在選育抗性品種過程中，開發(fā)與大白菜根腫病抗性基因緊密連鎖的分子標(biāo)記起著至關(guān)重要的作用。
　　經(jīng)調(diào)查，河南新野城郊鄉(xiāng)是河南省唯一發(fā)病嚴(yán)重的區(qū)域，本實驗在該地區(qū)進行田間抗性鑒定，為保證實驗的準(zhǔn)確性和重復(fù)性，種植前保證田間根腫菌分布均勻一致。室內(nèi)抗性鑒定建立在河南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院園藝研究所，菌源也是

3、來自河南新野。
　　本研究利用收集到的6個F1代抗病品種材料自交后構(gòu)建的F2代群體，利用室內(nèi)和田間進行抗性鑒定，對F2群體的表型進行鑒定，分析了不同材料的根腫病抗性遺傳規(guī)律，利用BSA（分離群體分組分析）法建立抗感池進行引物篩選，最終獲得了與抗根腫病緊密連鎖的分子標(biāo)記，并對抗病基因進行了初步定位。結(jié)果如下:
　　1.對6個F1代抗根腫病材料進行自交構(gòu)建F2代群體，利用田間抗性鑒定和室內(nèi)人工接種鑒定的方法對這6個F2代進行抗病

4、性鑒定，結(jié)果6個F2代群體均表現(xiàn)出抗感分離，經(jīng)卡方檢驗后均符合3∶1的孟德爾遺傳分離比，研究結(jié)果表明這6個F2群體中的根腫病抗性主要是由顯性單基因控制。
　　2.對這6個F2分離群體:Y635F2、Y636F2、Y637F2、Y642F2、Y664F2、Y665F2進行分子標(biāo)記分析。通過400多對引物篩選得到與群體Y635F2抗性基因連鎖的4個SSR標(biāo)記GC1160，GC2360-2，GC2920-2F和SASS70;在群體Y63

5、6F2中通過篩選獲得4個SSR連鎖標(biāo)記GC1160，GC2360-2，GC2920-2F,SASS70;在群體Y637F2中獲得4個SSR連鎖標(biāo)記GC3070，GC2920-2F，SASS70，BGA06，以上獲得的SSR標(biāo)記均位于大白菜染色體A03上。群體Y642F2獲得與抗病基因連鎖標(biāo)記為5個Indel標(biāo)記BrID10781、BrID11233、BrID10867、BSA2、BSA7和2個SSR標(biāo)記A08-S17、A08-S33，這

6、5個標(biāo)記均位于大白菜染色體A08上;群體Y664F2獲得與抗病基因連鎖的4個Indel標(biāo)記BrID10781、BrID110265、BrID11233、BrID10867和2個SSR標(biāo)記A08-S17、A08-S33，這6個標(biāo)記也位于大白菜染色體A08上;在群體Y665F2中則未發(fā)現(xiàn)與抗病基因緊密連鎖的分子標(biāo)記。
　　3.群體Y642F2和Y664F2的抗性基因定位在染色體A08上，其中群體Y642F2獲得連鎖的7個標(biāo)記中最近的一

7、個標(biāo)記BSA2與抗性基因相距16.9cM，標(biāo)記BrID10781與抗性基因相距48.0cM;群體Y664F2獲得連鎖的6個標(biāo)記中，最近的一個標(biāo)記A08-S17與抗性基因相距47.0cM，最遠的標(biāo)記BrID110265與抗性基因相距66.3cM。
　　本研究利用6個F2分離群體針對河南發(fā)病最為嚴(yán)重的新野菌源進行了抗性鑒定，初步獲得與根腫病抗性基因緊密連鎖的分子標(biāo)記，縮短了大白菜抗根腫病分子標(biāo)記輔助選擇育種的進程，同時該結(jié)果也為根腫病