B淋巴細(xì)胞及白細(xì)胞介素-12在OLP中的表達(dá).pdf

1、口腔扁平苔蘚(oral lichen planus,OLP),是口腔黏膜病中最常見(jiàn)的疾病之一,部分病損可發(fā)生惡變,世界衛(wèi)生組織(WHO)將其列為可能的癌前狀態(tài)。OLP的病因至今尚不十分清楚,目前認(rèn)為是一種T細(xì)胞介導(dǎo)的免疫反應(yīng),其病程慢性遷延,治療已成為臨床上一個(gè)相當(dāng)棘手的問(wèn)題,目前還沒(méi)有治愈OLP的方法。其典型病理特征為上皮不全角化,基底層液化變性,固有層密集的淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)帶。OLP淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)帶中雖以T細(xì)胞為主,但也有少量的B淋巴細(xì)胞

2、,約6％[1]。CD20是B淋巴細(xì)胞特有的表面標(biāo)記,它出現(xiàn)于前B淋巴細(xì)胞,B淋巴細(xì)胞激活分化將導(dǎo)致CD20的高表達(dá)[2],B淋巴細(xì)胞分化至成熟的漿細(xì)胞時(shí),CD20表達(dá)消失。單核細(xì)胞、靜息或活化的T細(xì)胞、裸細(xì)胞及非淋巴細(xì)胞均不表達(dá)CD20分子。IL-12是一種p35與p40結(jié)合成的異二聚體分子,在B淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞、角質(zhì)細(xì)胞以及DC中都有表達(dá)活性,其趨化作用主要由p40來(lái)完成。IL-12在Th1細(xì)胞介導(dǎo)的免疫反應(yīng)和炎癥性疾病中發(fā)揮著重要

3、作用。
　　 目的:
　　 本實(shí)驗(yàn)通過(guò)免疫組化技術(shù)及熒光實(shí)時(shí)定量PCR技術(shù)檢測(cè)正?？谇火つづcOLP中B淋巴細(xì)胞及IL-12的表達(dá)情況,以觀察B淋巴細(xì)胞及IL-12在兩種不同組織中的變化規(guī)律,探討其在口腔扁平苔蘚發(fā)生過(guò)程中的作用及意義,為臨床上治療口腔扁平苔蘚提供新的思路。
　　 方法:
　　 1.收集臨床及病理確診的口腔正常黏膜5例、OLP標(biāo)本20例,將每個(gè)標(biāo)本的連續(xù)切片分別進(jìn)行HE染色、CD20及IL-

4、12p40免疫組化分析和陰性對(duì)照,根據(jù)免疫組化結(jié)果從蛋白水平觀察CD20、IL-12p40在不同組織中的表達(dá)情況。
　　 2.收集正?？谇徽衬そM織和臨床及病理確診的OLP各6例,應(yīng)用PCR技術(shù)檢測(cè)標(biāo)本中IL-12的表達(dá),驗(yàn)證引物設(shè)計(jì)合成物無(wú)誤后,進(jìn)行熒光實(shí)時(shí)定量PCR,檢測(cè)IL-12p40 mRNA在兩組中的表達(dá)情況。
　　 結(jié)果:
　　 1.CD20免疫組化結(jié)果顯示:在正常口腔黏膜中,CD20呈陰性表達(dá)。在OL

5、P組織中,CD20在固有層淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)帶中呈陽(yáng)性表達(dá),且遠(yuǎn)離基底膜側(cè)。
　　 2.IL-12p40免疫組化結(jié)果顯示:在正?？谇徽衬ぶ?IL-12p40呈陽(yáng)性表達(dá),主要位于棘層及顆粒層細(xì)胞以及結(jié)締組織中,其染色略淺。在OLP組織中,IL-12p40呈強(qiáng)陽(yáng)性表達(dá),其表達(dá)范圍與正?？谇火つぶ械南嗨?但其染色較正?？谇火つと旧?。
　　 3.IL-12p40熒光實(shí)時(shí)定量PCR結(jié)果顯示:與正?？谇徽衬ど掀ぜ敖Y(jié)締組織相比,口腔扁平

6、苔癬上皮及結(jié)締組織中IL-12p40 mRNA的表達(dá)量增多,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
　　 結(jié)論:
　　 CD20在正?？谇徽衬そM沒(méi)有表達(dá),而在OLP組織有表達(dá)。IL-12p40 mRNA及蛋白在正?？谇徽衬そM的上皮細(xì)胞和結(jié)締組織中的表達(dá)分別低于其在OLP組織中的表達(dá)。提示B淋巴細(xì)胞在口腔扁平苔癬的發(fā)生發(fā)展過(guò)程中可能發(fā)揮一定的作用--不僅可能與基底膜區(qū)IgG、IgM沉積有關(guān),還可能通過(guò)分泌IL-12來(lái)促進(jìn)Th1