大蒜種質資源的形態(tài)學評價、愈傷誘導再生和原生質體培養(yǎng).pdf

1、本試驗收集了來自中國、韓國和歐洲的71個大蒜品種，于2007年10月份種植在浙江大學華家池校區(qū)實驗農場試驗田。通過對所選大蒜形態(tài)學性狀的數值進行系統聚類分析，結果表明蒜頭重、播種至出苗所需天數及抽薹時間是影響其分類的重要指標。根據這些性狀可將試驗品種分為四類，歐洲品種和韓國品種與中國品種有較密切聯系。研究結果將為大蒜品種的親緣關系鑒定提供依據，也為進一步的品種演進研究和育種工作提供參考。 以陜西“蔡家坡”大蒜為材料，分別用其鱗莖

2、盤、莖尖、營養(yǎng)體為外植體，在含有不同6-BA和2,4-D濃度配比的MS或B5培養(yǎng)基上進行愈傷組織誘導形成的試驗，篩選誘導大蒜愈傷組織形成的最佳培養(yǎng)基，然后將誘導的愈傷組織繼代在含6-BA、2,4-D及NAA不同濃度組合的MS或B5培養(yǎng)基上，篩選愈傷增殖最快的培養(yǎng)基。再用繼代后的愈傷組織建立胚性懸浮細胞系，探索大蒜胚性懸浮細胞系建立的最佳條件；最后將愈傷及懸浮細胞置于含不同6-BA、2,4-D及NAA濃度配比的MS培養(yǎng)基上，記錄愈傷的分化

3、率和愈傷分化的芽數及根數，篩選大蒜植株再生的最佳激素組合。試驗結果表明：2,4-D在大蒜愈傷組織誘導及繼代培養(yǎng)中起關鍵作用，0.1mgl-1 6-BA+1.0或2.0 mgl-1 2,4-D培養(yǎng)基誘導大蒜莖盤愈傷效果最佳；1.0mgl-1 2,4-D適宜于愈傷增殖及保持。在MS+0.1mgl-1 6-BA+1.0 mgl-1 NAA培養(yǎng)基上，淡黃色致密顆粒愈傷的芽分化能力最強，每塊愈傷平均分化8.4個芽；同時氣生根的分化能力也較強，每塊

4、愈傷平均生根6.4條，其懸浮細胞再生效果更佳。將生根苗移栽于大田中，15d后成活率達到80％。本研究初步建立了一套大蒜離體快繁的體系。 本試驗還對大蒜原生質體培養(yǎng)進行了初步研究。分別用大蒜愈傷、幼葉及胚性懸浮細胞為材料，進行預備試驗篩選最佳原生質體的來源材料。將胚性懸浮細胞放入0.4mol 1-1、0.5 mol 1-1、0.6mol 1-1及0.7 mol 1-1甘露醇溶液中進行質壁分離試驗，確定滲透壓穩(wěn)定劑的種類及最佳濃度；

5、用不同酶液提取懸浮細胞的原生質體，每隔一段時間測定原生質體產量和活力，確定原生質體分離的最佳酶液組合及酶解時間；采用固液結合培養(yǎng)法在1/2 MS及B5培養(yǎng)基上培養(yǎng)。試驗結果表明大蒜胚性懸浮細胞是原生質體分離的適宜材料，0.5 mol 1-1甘露醇是最合適的滲透壓穩(wěn)定濃度，最佳大蒜懸浮細胞原生質體提取的酶液組合為2％纖維素酶(R-10)+0.2％果膠酶(Y-23)，酶解6h。目前為止培養(yǎng)的原生質體還沒有形成愈傷組織，有關培養(yǎng)進程仍在觀察中