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1、西南大學(xué)碩士學(xué)位論文南方紫花苜蓿(Medicago sativa L.)原生質(zhì)體培養(yǎng)及再生體系的研究姓名:王海波申請學(xué)位級別:碩士專業(yè):草業(yè)科學(xué)指導(dǎo)教師:玉永雄20070501西南大學(xué)碩士學(xué)位論文明顯提高原生質(zhì)體的完整性,完整產(chǎn)率達(dá)到1 4 .0 2 X 1 0 6 個(gè)/g ;質(zhì)膜穩(wěn)定劑以o .1 %2 - O q - 嗎啉) - 乙烷磺酸( Ⅻ巳S ) 最好,滲透壓穩(wěn)定劑以0 .6 m o I /L 葡萄糖最好.4 .在原生質(zhì)體培養(yǎng)中
2、,采用固液結(jié)合的“綜合”培養(yǎng)方法效果較好.其中營養(yǎng)看護(hù)培養(yǎng)的分裂頻率最高,達(dá)到5 .3 3 %;原生質(zhì)體培養(yǎng)密度以1 .5 x 1 0 6 個(gè)/g 為佳,2 ~3 天即可觀察到細(xì)胞分裂,2 5 ~3 0 天即可肉眼看到小愈傷組織,植板率達(dá)到0 .0 1 1 %:采用K M 8 p 基礎(chǔ)培養(yǎng)基、N A A 0 .5m 扎+ 2 , 4 - D 0 .5 m g /L ., , .6 - B A l .S m g /L 的激素組合以及1 3
3、 0 0 + 2 0 0m I ;,L 的C P 濃度效果最好;而在N I - I ( * /N 0 3 ’濃度比例調(diào)整中。隨著N m + 態(tài)氨的降低以及N 0 3 “ 態(tài)氮的升高,分裂頻率及植板率有上升的趨勢,在培養(yǎng)基中加入有機(jī)態(tài)的氮其上升趨勢會(huì)更加明顯.5 .對原生質(zhì)體再生植株進(jìn)行細(xì)胞水平的鑒定,結(jié)果表明:原生質(zhì)體再生植株與母株相比,染色體在長度、臂比、著絲粒指數(shù)等方面沒有明顯的差異,其核型均符合2 n = 缸= 3 2 = 2 9
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