白藜三醇對快速起搏致豬心房結構重構影響的實驗研究.pdf

1、目的：通過起搏器植入法快速起搏右心房建立豬慢性心房顫動模型，觀察白藜三醇（Resveratrol，RV）對慢性心房顫動時心房結構重構的影響以及MMP-1、MMP-9、TIMP-1與TGF-β1表達水平的變化，探討白藜三醇對豬慢性心房顫動時心房結構重構的影響及其可能機制。
　　 方法：18頭健康小家豬，隨機分為對照組(sham組，n=6)、快速起搏組(ATP組，n=6)和白藜三醇干預組(RV組，n=6)，采用Seldinger血管

2、穿刺技術送入雙極電極至右心房并連接實驗用起搏器，快速起搏心房(500次/分)2周，制備慢性AF實驗模型。三組豬分別于起搏前和起搏2周后進行電生理和經(jīng)胸壁超聲心動圖檢查以檢測AF的持續(xù)時間、左右心房大小及左右心房收縮期末面積。白藜三醇干預組豬于起搏前三天開始服用RV（2.5mg·kg-1·d-1）。起搏2周后取各組豬的左心房組織標本。HE染色、Masson染色法觀察心房組織形態(tài)學和間質(zhì)纖維化，用SPSS16.0圖像分析系統(tǒng)分析各組Mass

3、on染色圖片計算膠原總面積，然后計算膠原容積分數(shù)（collagen volume fraction, CVF）來反應間質(zhì)纖維化程度；Western-blot法檢測各組豬左心房肌組織中MMP-1、MMP-9、TIMP-1與TGF-β1蛋白表達水平；RT-PCR檢測各組豬左心房肌組織中MMP-1、MMP-9、TIMP-1與TGF-β1mRNA表達水平。
　　 結果：1．電生理特征：各組豬于快速起搏前均未誘發(fā)出AF?？焖儆倚姆科鸩?周

4、后，快速起搏組均可誘發(fā)出AF，AF的誘發(fā)率100％，其中有5頭豬可誘發(fā)出超過15min的持續(xù)性AF；白藜三醇干預組均未誘發(fā)出超過15min的持續(xù)性AF，但有4頭誘發(fā)出＜15min的AF；對照組AF誘發(fā)情況同術前無變化?？焖倨鸩M持續(xù)性AF的誘發(fā)率較對照組和白藜三醇干預組顯著增加及其房顫持續(xù)時間比白藜三醇干預組顯著延長（P＜0.05）。
　　 2．心房大?。嚎焖傩姆科鸩?周后，快速起搏組左、右心房面積同對照組及起搏前相比明顯增加（

5、P＜0.05）；白藜三醇干預組左、右心房面積雖大于對照組，但差異無統(tǒng)計學意義；與快速起搏組相比明顯減少(P＜0.05)。
　　 3．RT-PCR結果：測定快速心房起搏兩周后心房肌組織MMP-1、MMP-9、TIMP-1與TGF-β1 mRNA表達水平，結果顯示：①白藜三醇干預組TIMP-1 mRNA的表達較快速起搏組明顯增加(P＜0.05)，與對照組比較明顯減少（P＜0.05），快速起搏組TIMP-1 mRNA的表達較對照組明顯

6、減少（P＜0.05）；②白藜三醇干預組MMP-1mRNA的表達較快速起搏組明顯減少（P＜0.05），但與對照組比較差異無統(tǒng)計學意義，快速起搏組MMP-1 mRNA的表達較對照組明顯增加（P＜0.05）；③白藜三醇干預組MMP-9、TGF-β1mRNA的表達較快速起搏組明顯減少(P＜0.05)，與對照組比較表達明顯增加(P＜0.05)；快速起搏組MMP-9、TGF-β1mRNA的表達較對照組明顯增加（P＜0.05）。
　　 4．W

7、estern-Blot結果：測定快速心房起搏2周后心房組織中MMP-1、MMP-9、TIMP-1與TGF-β1蛋白的表達水平。結果顯示：①白藜三醇干預組TIMP-1蛋白的表達較快速起搏組明顯增加（P＜0.05），與對照組比較明顯減少（P＜0.05），快速起搏組TIMP-1蛋白的表達較對照組明顯減少(P＜0.05)；②白藜三醇干預組MMP-1、TGF-β1蛋白的表達較快速起搏組明顯減少(P＜0.05)，但與對照組比較差異無統(tǒng)計學意義，快速

8、起搏組MMP-1、TGF-β1蛋白的表達較對照組明顯增加（P＜0.05）；③白藜三醇干預組MMP-9蛋白的表達較快速起搏組明顯減少(P＜0.05)，與對照組比較表達明顯增加(P＜0.05)；快速起搏組MMP-9蛋白的表達較對照組明顯增加（P＜0.05）。
　　 5．光鏡結果：(1)HE染色結果顯示假手術組豬心房肌纖維排列整齊、有序；起搏組豬心房肌細胞肥大，肌纖維排列紊亂，細胞核大小不一，部分區(qū)域肌纖維完全溶解、心肌間質(zhì)可見纖維組

9、織增生；白藜三醇干預組心房肌的病理學改變輕于起搏組。(2)Masson染色結果顯示假手術組和白藜三醇干預組豬心房肌間質(zhì)中僅見極少量膠原纖維；快速起搏組豬心房肌間質(zhì)中纖維組織顯著增生，心房肌細胞周圍明顯可見大量膠原纖維包繞。
　　 結論：豬AF模型的心房組織出現(xiàn)心肌結構重構的病理表現(xiàn)，表現(xiàn)為心房組織中心房面積增大及間質(zhì)纖維化，同時MMP-1、MMP-9、TGF-β1表達增加，TIMP-1表達降低，其表達失衡與AF的結構重構密切相關