白藜三醇對(duì)快速起搏致豬心房結(jié)構(gòu)重構(gòu)影響的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：通過起搏器植入法快速起搏右心房建立豬慢性心房顫動(dòng)模型，觀察白藜三醇（Resveratrol，RV）對(duì)慢性心房顫動(dòng)時(shí)心房結(jié)構(gòu)重構(gòu)的影響以及MMP-1、MMP-9、TIMP-1與TGF-β1表達(dá)水平的變化，探討白藜三醇對(duì)豬慢性心房顫動(dòng)時(shí)心房結(jié)構(gòu)重構(gòu)的影響及其可能機(jī)制。
　　 方法：18頭健康小家豬，隨機(jī)分為對(duì)照組(sham組，n=6)、快速起搏組(ATP組，n=6)和白藜三醇干預(yù)組(RV組，n=6)，采用Seldinger血管

2、穿刺技術(shù)送入雙極電極至右心房并連接實(shí)驗(yàn)用起搏器，快速起搏心房(500次/分)2周，制備慢性AF實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?。三組豬分別于起搏前和起搏2周后進(jìn)行電生理和經(jīng)胸壁超聲心動(dòng)圖檢查以檢測(cè)AF的持續(xù)時(shí)間、左右心房大小及左右心房收縮期末面積。白藜三醇干預(yù)組豬于起搏前三天開始服用RV（2.5mg·kg-1·d-1）。起搏2周后取各組豬的左心房組織標(biāo)本。HE染色、Masson染色法觀察心房組織形態(tài)學(xué)和間質(zhì)纖維化，用SPSS16.0圖像分析系統(tǒng)分析各組Mass

3、on染色圖片計(jì)算膠原總面積，然后計(jì)算膠原容積分?jǐn)?shù)（collagen volume fraction, CVF）來反應(yīng)間質(zhì)纖維化程度；Western-blot法檢測(cè)各組豬左心房肌組織中MMP-1、MMP-9、TIMP-1與TGF-β1蛋白表達(dá)水平；RT-PCR檢測(cè)各組豬左心房肌組織中MMP-1、MMP-9、TIMP-1與TGF-β1mRNA表達(dá)水平。
　　 結(jié)果：1．電生理特征：各組豬于快速起搏前均未誘發(fā)出AF。快速右心房起搏2周

4、后，快速起搏組均可誘發(fā)出AF，AF的誘發(fā)率100％，其中有5頭豬可誘發(fā)出超過15min的持續(xù)性AF；白藜三醇干預(yù)組均未誘發(fā)出超過15min的持續(xù)性AF，但有4頭誘發(fā)出＜15min的AF；對(duì)照組AF誘發(fā)情況同術(shù)前無變化?？焖倨鸩M持續(xù)性AF的誘發(fā)率較對(duì)照組和白藜三醇干預(yù)組顯著增加及其房顫持續(xù)時(shí)間比白藜三醇干預(yù)組顯著延長(zhǎng)（P＜0.05）。
　　 2．心房大?。嚎焖傩姆科鸩?周后，快速起搏組左、右心房面積同對(duì)照組及起搏前相比明顯增加（

5、P＜0.05）；白藜三醇干預(yù)組左、右心房面積雖大于對(duì)照組，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；與快速起搏組相比明顯減少(P＜0.05)。
　　 3．RT-PCR結(jié)果：測(cè)定快速心房起搏兩周后心房肌組織MMP-1、MMP-9、TIMP-1與TGF-β1 mRNA表達(dá)水平，結(jié)果顯示：①白藜三醇干預(yù)組TIMP-1 mRNA的表達(dá)較快速起搏組明顯增加(P＜0.05)，與對(duì)照組比較明顯減少（P＜0.05），快速起搏組TIMP-1 mRNA的表達(dá)較對(duì)照組明顯

6、減少（P＜0.05）；②白藜三醇干預(yù)組MMP-1mRNA的表達(dá)較快速起搏組明顯減少（P＜0.05），但與對(duì)照組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，快速起搏組MMP-1 mRNA的表達(dá)較對(duì)照組明顯增加（P＜0.05）；③白藜三醇干預(yù)組MMP-9、TGF-β1mRNA的表達(dá)較快速起搏組明顯減少(P＜0.05)，與對(duì)照組比較表達(dá)明顯增加(P＜0.05)；快速起搏組MMP-9、TGF-β1mRNA的表達(dá)較對(duì)照組明顯增加（P＜0.05）。
　　 4．W

7、estern-Blot結(jié)果：測(cè)定快速心房起搏2周后心房組織中MMP-1、MMP-9、TIMP-1與TGF-β1蛋白的表達(dá)水平。結(jié)果顯示：①白藜三醇干預(yù)組TIMP-1蛋白的表達(dá)較快速起搏組明顯增加（P＜0.05），與對(duì)照組比較明顯減少（P＜0.05），快速起搏組TIMP-1蛋白的表達(dá)較對(duì)照組明顯減少(P＜0.05)；②白藜三醇干預(yù)組MMP-1、TGF-β1蛋白的表達(dá)較快速起搏組明顯減少(P＜0.05)，但與對(duì)照組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，快速

8、起搏組MMP-1、TGF-β1蛋白的表達(dá)較對(duì)照組明顯增加（P＜0.05）；③白藜三醇干預(yù)組MMP-9蛋白的表達(dá)較快速起搏組明顯減少(P＜0.05)，與對(duì)照組比較表達(dá)明顯增加(P＜0.05)；快速起搏組MMP-9蛋白的表達(dá)較對(duì)照組明顯增加（P＜0.05）。
　　 5．光鏡結(jié)果：(1)HE染色結(jié)果顯示假手術(shù)組豬心房肌纖維排列整齊、有序；起搏組豬心房肌細(xì)胞肥大，肌纖維排列紊亂，細(xì)胞核大小不一，部分區(qū)域肌纖維完全溶解、心肌間質(zhì)可見纖維組

9、織增生；白藜三醇干預(yù)組心房肌的病理學(xué)改變輕于起搏組。(2)Masson染色結(jié)果顯示假手術(shù)組和白藜三醇干預(yù)組豬心房肌間質(zhì)中僅見極少量膠原纖維；快速起搏組豬心房肌間質(zhì)中纖維組織顯著增生，心房肌細(xì)胞周圍明顯可見大量膠原纖維包繞。
　　 結(jié)論：豬AF模型的心房組織出現(xiàn)心肌結(jié)構(gòu)重構(gòu)的病理表現(xiàn)，表現(xiàn)為心房組織中心房面積增大及間質(zhì)纖維化，同時(shí)MMP-1、MMP-9、TGF-β1表達(dá)增加，TIMP-1表達(dá)降低，其表達(dá)失衡與AF的結(jié)構(gòu)重構(gòu)密切相關(guān)