新型可注射、可降解磷酸鈣骨水泥的生物相容性研究.pdf

1、目的：從急性毒性、熱原、溶血、遲發(fā)型超敏、體內(nèi)哺乳動物紅細胞微核、短期肌肉內(nèi)埋植、體外細胞毒性實驗等對新型可注射、可降解磷酸鈣骨水泥的生物安全性進行較全面的評價。
　　 方法：①在急性全身毒性實驗中，將供試品通過尾靜脈注射給予昆明小鼠，在注射后即刻、4、24、48、72小時觀察實驗組和對照組昆明鼠的一般狀態(tài)、毒性表現(xiàn)和死亡動物數(shù)，以及72小時后的動物體重；②在熱原實驗中，將一定劑量供試品經(jīng)耳緣靜脈注入新西蘭兔體內(nèi)，觀察3只實驗用

2、兔的體溫升高情況；③在溶血實驗中，將新鮮制備的抗凝兔血加入供試品中，觀察各組是否出現(xiàn)溶血現(xiàn)象，并測其吸光度；④在遲發(fā)型超敏實驗中，受試動物經(jīng)供試品的兩步誘導(dǎo)和激發(fā)后，觀察激發(fā)部位皮膚情況；⑤在微核實驗中，將受試品通過腹腔注射給予受試動物，取其雙側(cè)股骨內(nèi)骨髓，制備涂片，油鏡觀察，計算各組PCES占紅細胞總數(shù)的比值，用作骨髓毒性的指示，并進行統(tǒng)計學(xué)比較其遺傳毒性；⑥在短期肌肉內(nèi)埋植(植入后局部反應(yīng))實驗中，將測試樣品無菌植入受試動物背部肌肉

3、中，在植入后1、4、12周時進行植入部位組織實驗室觀察和病理解剖，并對觀察結(jié)果進行分析；⑦在體外細胞毒性實驗中，將供試品與特定細胞系接觸，用MTT法測定細胞相對增殖率，評價其對細胞的毒性作用和程度。
　　 結(jié)果：①在急性毒性實驗中，注射后所有動物于各觀察時間點均沒有出現(xiàn)不良反應(yīng)，實驗組動物癥狀和體重的變化都在可接受的范圍之內(nèi)，可以認為新型骨水泥無急性全身毒性作用。②熱原實驗中，3只家兔的體溫升高均低于0.6℃，且3只家兔的升溫總

4、和低于1.4℃，可以認為新型骨水泥沒有致熱性。③溶血實驗中陽性對照管中觀察到溶血現(xiàn)象，實驗品和陰性對照管中未見溶血現(xiàn)象。測各組吸光度，得到實驗組溶血率為0.47％，小于5％，表明新型骨水泥沒有引起溶血反應(yīng)。④遲發(fā)型超敏實驗中，實驗組和對照組的紅斑和水腫記分等級均為0，故新型骨水泥無潛在皮膚致敏性。⑤微核實驗中，各組PCEs占紅細胞總數(shù)的比值的差別均無統(tǒng)計學(xué)意義，計算各組MPCEs在PCEs中所占的數(shù)量，陽性對照的雌雄兩組與樣品組雌雄兩組

5、的差別均有統(tǒng)計學(xué)意義，陰性對照與樣品組的差別均無統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié)果表明，被測樣品浸提液不會對小鼠產(chǎn)生遺傳毒性。⑥在短期肌肉內(nèi)埋植實驗中，材料被植入后未見周圍組織明顯壞死，1周時有輕度炎癥反應(yīng)，隨時間推移，炎癥反應(yīng)逐漸消退，并出現(xiàn)纖維包裹。結(jié)果表明，新型骨水泥在局部植入后有良好的組織相容性。⑦體外細胞毒性實驗中，實驗組與陰性對照組相比無明顯形態(tài)差異。定量測試結(jié)果表明，實驗品毒性為0～1級，定量測試和定性測試的結(jié)果均表明，新型磷酸鈣骨水泥無明