焦?fàn)t工ERCC8和ERCC6基因多態(tài)性與淋巴細(xì)胞DNA損傷的聯(lián)系.pdf

1、多環(huán)芳烴（Polycyclic aromatic hydrocarbons，PAHs）已被國際癌癥研究署（International Agency for Research on Cancer，IARC）為“I類致癌物”。在焦化生產(chǎn)過程中，焦?fàn)t作業(yè)工人長期暴露于含有PAHs的焦?fàn)t逸散物，是導(dǎo)致焦?fàn)t工肺癌的重要原因。PAHs在體內(nèi)轉(zhuǎn)化時(shí)產(chǎn)生的代謝產(chǎn)物，一方面在體內(nèi)形成了大量的大分子DNA加合物，另一方面造成了嚴(yán)重的DNA氧化損傷。切除修復(fù)

2、交叉互補(bǔ)組6（Excision repair cross-complementing group 6，ERCC6 ）和切除修復(fù)交叉互補(bǔ)組8（Excision repair cross-complementing group 8，ERCC8 ）作為轉(zhuǎn)錄偶聯(lián)修復(fù)（transcription-coupled repair，TCR）途徑的核心基因，在多環(huán)芳烴所致的DNA損傷修復(fù)過程中具有的重要作用。單核苷酸多態(tài)性（Single nucleoti

3、de polymorphism，SNP）作為遺傳標(biāo)記，已被廣泛用于研究多基因疾病和環(huán)境相關(guān)疾病中。如今，人類基因組計(jì)劃的完成，特別是HapMap計(jì)劃的順利實(shí)施為研究者提供了較為系統(tǒng)的單核苷酸多態(tài)性的圖譜，為深入研究奠定了基礎(chǔ)。以往研究發(fā)現(xiàn)在相同外暴露條件下，焦?fàn)t工DNA損傷程度存在較大差異，提示遺傳因素可能起到一定作用。因此，研究ERCC6和ERCC8基因多態(tài)性對焦?fàn)t工DNA損傷修復(fù)的影響對了解職業(yè)人群的遺傳易感性具有重要意義。

4、 本研究以HapMap中國人群的數(shù)據(jù)為基礎(chǔ)，并結(jié)合文獻(xiàn)報(bào)道以及生物信息學(xué)軟件PupaSuite預(yù)測，選擇標(biāo)簽單核苷酸多態(tài)性(Tagging SNPs，TagSNPs)，采用TaqMan-MGB探針基因分型技術(shù)，選取暴露組379人，恢復(fù)組398人，對照組398人，共6個(gè)多態(tài)性位點(diǎn)進(jìn)行了基因分型。校正了工齡，吸煙指數(shù)，飲酒及一羥基芘的影響后，結(jié)果顯示焦?fàn)t工外周血淋巴細(xì)胞的Olive尾矩為-0.86±0.70（對數(shù)轉(zhuǎn)換值），顯著高于恢復(fù)組(-

5、1.14±0.68)和對照組(-1.13±0.65)，和文獻(xiàn)研究結(jié)果一致，而恢復(fù)組與對照組之間沒有顯著性差異，提示了暴露恢復(fù)大約16小時(shí)后損傷得到修復(fù)。暴露組中，年齡大于36歲亞組中Rs3793784位點(diǎn)CC、CG和GG基因型攜帶者外周血淋巴細(xì)胞的OTM分別為-0.71±0.69,-0.96±0.69和-0.92±0.77，有顯著差異（P<0.05）；在一羥基芘大于4.36μmol/molCr的亞組中Rs2228527位點(diǎn)CC和CT+T

6、T基因型攜帶者外周血淋巴細(xì)胞的OTM分別為-0.86±0.71和-0.56±1.07，有顯著性差異?；謴?fù)組中，Rs158920位點(diǎn)CC和CT+TT基因型攜帶者外周血淋巴細(xì)胞的OTM分別為-1.10±0.69和-1.29±0.64，有顯著性差異。 綜上所述，本研究發(fā)現(xiàn)PAHs暴露后引起DNA損傷顯著增加，而恢復(fù)大約16小時(shí)后損傷基本恢復(fù)。遺傳易感性的結(jié)果提示兩個(gè)基因的多個(gè)變異與焦?fàn)t作業(yè)工人外周血淋巴細(xì)胞DNA損傷和恢復(fù)相關(guān)聯(lián)。

7、 本研究的創(chuàng)新之處在于： （1）目前尚未有關(guān)于ERCC8基因多態(tài)性的研究的報(bào)道，本研究首次對ERCC8基因多態(tài)性與DNA 損傷進(jìn)行關(guān)聯(lián)性研究。 （2）系統(tǒng)的研究了ERCC6和ERCC8基因多態(tài)性對焦?fàn)t工DNA損傷的影響。 （3）增加了暴露后恢復(fù)16個(gè)小時(shí)的人群，并且探索了基因多態(tài)性對暴露后DNA損傷恢復(fù)的影響。本研究有待深入的地方：對SNPs位點(diǎn)的細(xì)胞功能學(xué)研究不足，如可采用報(bào)告基因轉(zhuǎn)染，凝膠遷移率實(shí)驗(yàn)等技術(shù)