壓力作用下純化大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞DNA單鏈斷裂修復(fù)與凋亡的實(shí)驗(yàn)觀察.pdf_第1頁(yè)
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文檔簡(jiǎn)介

1、目的：觀察原代培養(yǎng)的純化視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞（Retinal Ganglion Cells，RGCs）在不同壓力和時(shí)間下，是否出現(xiàn)DNA單鏈斷裂修復(fù)以及其變化趨勢(shì)，探討該損傷與凋亡之間的聯(lián)系，為進(jìn)一步了解青光眼發(fā)病機(jī)制和有效實(shí)施視神經(jīng)保護(hù)提供初步理論參考。 方法：取生后1-3dSD大鼠乳鼠視網(wǎng)膜，運(yùn)用兩步免疫盤化法(two-step immune panning)獲得純化RGCs，選擇適當(dāng)培養(yǎng)條件培養(yǎng)純化RGCs用于制備體外加壓培養(yǎng)

2、模型，分別通過單細(xì)胞凝膠電泳和流式細(xì)胞儀檢測(cè)在不同壓力（0mmHg、40mmHg、60mmHg和80mmHg）作用下不同時(shí)點(diǎn)（12h、24h和48h）RGCs的DNA單鏈斷裂損傷、修復(fù)和細(xì)胞凋亡，并探討它們之間的關(guān)系。 結(jié)果：①各組壓力作用下的RGCs均可觀察到彗星細(xì)胞，其數(shù)量和Olive尾距（OTM）隨壓力和時(shí)間的增長(zhǎng)明顯增加（P<0.05），其中60mmHg下24h-48h為增長(zhǎng)快速期；②該DNA單鏈斷裂損傷存在修復(fù)；③凋亡

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