2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、酸堿平衡或pH影響許多重要的生理學(xué)過程,比如影響中樞系統(tǒng)的興奮性以及哺乳動物的生殖過程等等。因此保持機體及細(xì)胞的酸堿穩(wěn)態(tài)具有重要的生理學(xué)意義。細(xì)胞具有一系列復(fù)雜的分子機制來調(diào)控細(xì)胞內(nèi)外環(huán)境的酸堿平衡。
   SLC4家族(solute carrier 4 family)的鈉離子偶聯(lián)碳酸氫根轉(zhuǎn)運蛋白NCBT(Na-coupled HCO3-transporter)在細(xì)胞pH調(diào)控以及HCO3–的跨上皮細(xì)胞轉(zhuǎn)運中具有重要作用。這些NC

2、BT包括五個不同基因的產(chǎn)物,根據(jù)離子轉(zhuǎn)運模式的不同,可以將這些NCBT分為兩類:(1)生電性的NBCe1(SLC4A4)、NBCe2(SLC4A5);(2)電中性的NBCn1(SLC4A7)、NBCn2(SLC4A10)、NDCBE(SLC4A8)。
   由于轉(zhuǎn)錄啟動子的不同或mNRA選擇性剪切單元的存在,每種NCBT基因均可產(chǎn)生多種不同的剪切體。譬如編碼生電性NBCe1的SLC4A4基因含有兩個不同的轉(zhuǎn)錄啟動子,此外,羧基端

3、含有一個選擇性剪切單元。理論上SLC4A4可以產(chǎn)生四種不同的NBCe1剪切體。前人已經(jīng)發(fā)現(xiàn)三種NBCe1剪切體:NBCe1-A,NBCe1-B和NBCe1-C。NBCe1-A具有較短的獨特的氨基末端(Nt),而NBCe1-B和C具有共同的較長的Nt。第二個例子是編碼電中性NBCn2的SLC4A10基因,該基因目前已經(jīng)發(fā)現(xiàn)有兩個不同的選擇性剪切單元。理論上SLC4A10基因也可以產(chǎn)生四種剪切體:NBCn2-A/B/C/D,前人的研究已經(jīng)克

4、隆了NBCn2-A/B/C的cDNA,但是NBCn2-D的cDNA還未見成功克隆。
   本研究中,我們以小鼠為實驗對象,對Slc4a4和Slc4a10選擇性剪切異構(gòu)體的表達(dá)進(jìn)行了研究。我們通過RT-PCR技術(shù),在mRNA水平上系統(tǒng)研究了NBCe1不同剪切體在小鼠的生殖道組織中的表達(dá)及分布。在小鼠生殖道組織中,我們成功地克隆并鑒定出了五種NBCe1的剪切異構(gòu)體:NBCe1-A/B/C/D/E,其中NBCe1-D和NBCe1-E是

5、我們首次克隆的新型剪切異構(gòu)體。與NBCe1-A/B/C比較,NBCe1-D/E缺失了一段27堿基的序列,即cassette I。Cassette I是我們新發(fā)現(xiàn)的Slc4a4基因的一個選擇性剪切單元,它的缺失由于Slc4a4的第六外顯子的選擇性剪切方式所致。
   NBCn2主要表達(dá)在中樞系統(tǒng)中。在本研究中,我們通過cDNA克隆,從小鼠延腦(MD)和大腦皮下層(SCX)組織中均成功的克隆了NBCn2-D。通過菌落PCR技術(shù),我們

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