選擇性COX-2抑制劑對人前列腺癌的生長抑制及放射增敏作用實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：觀察選擇性COX-2抑制劑NS398對前列腺癌細(xì)胞PC-3增殖和凋亡的影響；探討選擇性COX-2抑制劑NS398對前列腺癌PC-3細(xì)胞放射敏感性的影響；觀察選擇性COX-2抑制劑Celecoxib聯(lián)合外照射對人前列腺癌PC-3細(xì)胞裸鼠移植瘤的生長抑制作用，并探討其放射增敏作用的可能機(jī)制。 方法：采用四甲基偶氮唑藍(lán)法(MTT法)檢測不同濃度和不同時(shí)間NS398對PC-3細(xì)胞增殖的影響；RT-PCR法檢測不同濃度NS398作用

2、PC-3細(xì)胞24h后COX-2mRNA的表達(dá)；酶聯(lián)免疫測定法(ELIASA)檢測不同濃度NS398作用PC-3細(xì)胞24h后PGE<,2>釋放水平；流式細(xì)胞儀檢測不同濃度NS398作用PC-3細(xì)胞24h后細(xì)胞凋亡情況。 分別將0、10、100μmol/L NS398藥物濃度作用PC-3細(xì)胞24h后，用直線加速器分別給予0、1、2、3、4、6、8、10Gy劑量照射，采用集落形成法檢測NS398對人前列腺癌PC-3細(xì)胞的放射增敏效應(yīng)。

3、 構(gòu)建人前列腺癌裸鼠移植瘤模型，Celecoxib和/或移植瘤局部放射干預(yù)，檢測抑制瘤生長延緩、移植瘤組織中COX-2 mRNA表達(dá)與前列腺素E<,2>含量的變化，并分析此變化與移植瘤生長延緩的關(guān)系。 結(jié)果：NS398可以抑制PC-3細(xì)胞的增殖，呈時(shí)間和劑量依賴性；RT-PCR和ELISA法檢測結(jié)果顯示，隨著NS398濃度增高，PC-3細(xì)胞COX-2：mPNA表達(dá)和PGE<,2>釋放水平呈下調(diào)趨勢；細(xì)胞凋亡檢測結(jié)果顯示1

4、00、200μmol/L NS398對PC-3細(xì)胞具有誘導(dǎo)凋亡的作用。 采用10、100μmol/L NS398作用24h后，與對照組相比，10μmol/L組未能檢測到放射增敏作用，而100μmol/L組能檢測到放射增敏作用，其放射敏感性指標(biāo)的SF<,2>、Do<,0.01>、D<,0>、Dq均出現(xiàn)不同程度下降。 移植瘤最大徑從8mm生長至12mm所需的時(shí)間，空白對照組為(6.18±0.72)d，Celecoxib治療組

5、為(7.87±0.70)d，單純照射治療組為(10.29±0.98)d，Celecoxib+照射聯(lián)合治療組為(12.62±1.28)d；4組移植瘤組織中COX-2 mRNA表達(dá)水平無明顯差異；前列腺素E<,2>含量分別為：空白對照組(68.4±10.2)pg/100mg，單純Celecoxib組(29.7±8.2)pg/100mg，單純照射組(46.3±9.4)pg/100mg，Celecoxib+照射聯(lián)合組為(43.6±12.7)pg

6、/100mg，與空白對照組比較差異均有顯著性(P<0.05)，但Celecoxib+照射聯(lián)合組與單純照射組的前列腺素E<,2>含量無顯著差異(P>0.05)。 結(jié)論：NS398可能通過COX-2依賴性途徑抑制前列腺癌PC-3細(xì)胞增殖，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞凋亡。 選擇性COX-2抑制劑NS398在體外實(shí)驗(yàn)中可以提高人前列腺癌PC-3細(xì)胞的放射敏感性，選擇性COX-2抑制劑有可能成為治療前列腺癌的放射增敏劑。 Celecox