選擇性COX-2抑制劑聯(lián)合順鉑對肺癌新生血管的影響及機制研究.pdf

1、目的：在體內(nèi)研究選擇性環(huán)氧化酶-2（ cyclooxtgenase-2，COX-2）抑制劑尼美舒利（Nimesulide，NIM）單獨應(yīng)用以及聯(lián)合順鉑(Cisplatin，CDDP)對肺癌A549細胞裸鼠移植瘤血管新生的影響及其機制，為肺癌的治療提供新思路。
　　方法：（1）培養(yǎng)肺癌A549細胞，構(gòu)建肺癌A549裸鼠移植瘤模型。（2）藥物干預(yù)，對照組（羧甲基纖維素鈉CMC灌胃，d1-d21），尼美舒利組（尼美舒利 NIM60mg/

2、kg/d灌胃，d1-d21），順鉑組（順鉑 DDP5mg/kg/4d，d1、d5、d9、d13、d17、d21），尼美舒利與順鉑聯(lián)合組(尼美舒利60mg/kg/d灌胃，d1-d21；順鉑5mg/kg/4d，d1、d5、d9、d13、d17、d21)，每組8只，觀察一般狀態(tài)。給藥21天后頸椎脫臼處死裸鼠，獲取腫瘤組織，稱取瘤重、測量瘤徑，計算抑瘤率。（3）檢測肺癌 A549裸鼠移植瘤內(nèi)新生血管密度（MVD），用 CD31標(biāo)記微血管，采用微

3、血管計數(shù)法檢測血管密度MVD，以明確尼美舒利單獨或者聯(lián)合順鉑對肺癌A549裸鼠移植瘤新生血管的影響。（4）用免疫組化檢測肺癌A549裸鼠移植瘤內(nèi)新生血管因子，如：血管內(nèi)皮生長因子VEGF、血管轉(zhuǎn)換生長因子TGF-β、環(huán)氧化酶COX-2、堿性成纖維細胞生長因子bFGF，以明確尼美舒利單獨或者聯(lián)合順鉑對肺癌A549裸鼠移植瘤新生血管的影響及其機制。
　　結(jié)果：（1）成功構(gòu)建肺癌A549裸鼠移植瘤模型，裸鼠背部皮下形成圓形、橢圓形、不規(guī)

4、則形結(jié)節(jié)。（2）NIM對肺癌A549細胞裸鼠移植瘤的生長有抑制作用，NIM組瘤重抑瘤率為11.25％，體積抑瘤率為23.03%。DDP組瘤重抑瘤率為34.02%，體積抑瘤率為47.48%；NIM+DDP聯(lián)合組瘤重抑瘤率為47.70%，體積抑瘤率為65.23%。（3）NIM+DDP組對腫瘤的抑制最強，并且NIM+DDP組肺癌A549裸鼠移植瘤體積與NIM組、DDP組、對照組比較，NIM+DDP組肺癌 A549裸鼠移植瘤體積最小，抑瘤率最大

5、，（P＜0.01），有明顯差異，有統(tǒng)計學(xué)意義。（4）NIM單藥組的MVD為27.25±5.142；DDP組MVD為20.25±4.323；NIM+DDP組MVD為13.875±3.723；對照組MVD為36.75±6.139。NIM單藥組與對照組相比較，NIM組的MVD值較小，（P＜0.05），有差異，具有統(tǒng)計學(xué)意義。NIM+DDP聯(lián)合組的MCV值低于DDP組＜NIM組＜對照組，（P＜0.05），有顯著性。（5）促進血管生成的因子VEG

6、F、bFGF、TGF-β1陽性染色定位于胞漿染色，呈棕黃色彌漫分布。尼美舒利組與對照組的陽性表達無明顯差異（P＞0.05）；NIM+DDP組的VEGF、bFGF、TGF-β1的陽性表達最弱，NIM+DDP組和DDP組的陽性表達比較，有明顯差異（P＜0.05）。DDP組與尼美舒利組的陽性表達比較（P＜0.05），有統(tǒng)計學(xué)意義。（6）COX-2陽性染色定位于胞質(zhì)和胞膜染色，呈棕黃色彌漫著色，利用陽性細胞數(shù)評定，NIM+DDP組分別與對照組、

7、NIM組、DDP組比較（P＜0.05），COX-2陽性表達呈對照組＞NIM組＞DDP組＞NIM+DDP組。
　　結(jié)論：（1）選擇性COX-2抑制劑單獨使用有抑制新生血管生成的作用，推測選擇性COX-2抑制劑具有抗腫瘤能力，可能成為肺癌靶向治療因子。（2）選擇性COX-2抑制劑聯(lián)合順鉑對新生血管因子表達的抑制效果更顯著，對肺癌A549細胞裸鼠移植瘤的生長的抑制更顯著，因此推測，選擇性C OX-2抑制劑具有協(xié)同抗腫瘤的作用，將有可能成