急性心梗后自體骨髓單核細(xì)胞移植對梗死心肌影響的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、冠心病在發(fā)達(dá)國家的發(fā)病率和死亡率都居于第一位。通常認(rèn)為，心肌細(xì)胞在出生后不能再生。心肌細(xì)胞死亡后，其余心肌細(xì)胞通過細(xì)胞肥大而不是心肌細(xì)胞增生來代償。大量的心肌細(xì)胞死亡后由疤痕組織替代，導(dǎo)致局部的心肌收縮紊亂，心功能下降，最后導(dǎo)致充血性心衰。 細(xì)胞移植心肌成形術(shù)針對心衰的基本病理生理，通過將適當(dāng)?shù)墓w細(xì)胞移植入受損的心肌內(nèi)，增加具有收縮功能的肌性細(xì)胞數(shù)目，改善心心室重構(gòu)，促進(jìn)梗死區(qū)血管新生，是一種新的治療冠心病和心衰的方法。

2、 以貴州香豬為研究對象,提取分離標(biāo)記自體骨髓單核細(xì)胞，建立香豬急性心肌梗死模型，分別在梗死區(qū)域內(nèi)經(jīng)心肌局部注射和經(jīng)結(jié)扎的冠狀動脈遠(yuǎn)端注射自體骨髓單核細(xì)胞，研究急性心肌梗死后自體骨髓單核細(xì)胞移植的心肌再生效果及對梗死心肌的保護(hù)作用，為臨床應(yīng)用骨髓單核細(xì)胞治療心肌疾病提供試驗(yàn)依據(jù)。全文共分四部分： 第一部分骨髓單核細(xì)胞移植誘導(dǎo)梗死心肌區(qū)域心肌再生的實(shí)驗(yàn)研究。 目的: 研究骨髓單核細(xì)胞梗死心肌移植后的心肌再生作用。

3、方法: 貴州香豬24只，隨機(jī)分為對照組(C組)，實(shí)驗(yàn)組(E組)。抽取骨髓液3ml，按照Ficoll密度剃度離心方法分離出骨髓單核細(xì)胞，PKH26 Red紅色熒光標(biāo)記。開胸結(jié)扎左冠狀動脈前降支后，實(shí)驗(yàn)組將熒光標(biāo)記后的自體骨髓單核細(xì)胞分別經(jīng)結(jié)扎的左冠狀動脈前降支遠(yuǎn)端和心肌內(nèi)注射，C組以PBS對照。術(shù)后3, 6周取心肌標(biāo)本行免疫組化。 結(jié)果:梗死區(qū)域可觀察再生的心肌細(xì)胞，這些細(xì)胞能表達(dá)MHC, cTnT I。 結(jié)論:骨髓單核細(xì)

4、胞移植可促進(jìn)梗死心肌區(qū)域內(nèi)心肌再生。 第二部分：骨髓單核細(xì)胞移植改善梗死心肌結(jié)構(gòu)及收縮力的實(shí)驗(yàn)研究。 目的：探討骨髓單核細(xì)胞移植對梗死心肌基本結(jié)構(gòu)及心肌收縮力的影響。 方法: 貴州香豬24只，隨機(jī)分為對照組(C組)，實(shí)驗(yàn)組(E組)。抽取骨髓液3ml，按照Ficoll密度剃度離心方法分離出骨髓單核細(xì)胞，PKH26 Red紅色熒光標(biāo)記。開胸結(jié)扎左冠狀動脈前降支后，實(shí)驗(yàn)組將熒光標(biāo)記后的自體骨髓單核細(xì)胞分別經(jīng)結(jié)扎的左冠狀

5、動脈前降支遠(yuǎn)端和心肌內(nèi)注射，C組以PBS對照。術(shù)后3， 6周取標(biāo)本，組織切片染色觀察組織基本結(jié)構(gòu)和體外藥物刺激離體肌條檢測心肌收縮情況。 結(jié)果：實(shí)驗(yàn)組與對照組比較，VG染色顯示膠原纖維融合較少，組織結(jié)構(gòu)排列基本處于有序狀態(tài)。實(shí)驗(yàn)組心肌收縮力明顯高于對照組(P<0.001)，且隨時(shí)間推移恢復(fù)程度增加(P<0.05)。 結(jié)論：骨髓單核細(xì)胞移植對梗死心肌組織結(jié)構(gòu)起到保護(hù)作用，并可促進(jìn)梗死心肌收縮力恢復(fù)。 第三部分骨髓單

6、核細(xì)胞移植促進(jìn)梗死心肌區(qū)血管新生的實(shí)驗(yàn)研究。 目的：研究骨髓單核細(xì)胞移植對梗死心肌血管新生的影響。 方法：貴州香豬24只，隨機(jī)分為對照組(C組)，實(shí)驗(yàn)組(E組)。抽取骨髓液3ml，按照Ficoll密度剃度離心方法分離出骨髓單核細(xì)胞，PKH26 Red紅色熒光標(biāo)記。開胸結(jié)扎左冠狀動脈前降支后，實(shí)驗(yàn)組將熒光標(biāo)記后的自體骨髓單核細(xì)胞分別經(jīng)結(jié)扎的左冠狀動脈前降支遠(yuǎn)端和心肌內(nèi)注射，C組以PBS對照。術(shù)后3，6周取標(biāo)本，免疫組化檢測