急性心梗后自體骨髓單核細胞移植對梗死心肌影響的實驗研究.pdf

1、冠心病在發(fā)達國家的發(fā)病率和死亡率都居于第一位。通常認為，心肌細胞在出生后不能再生。心肌細胞死亡后，其余心肌細胞通過細胞肥大而不是心肌細胞增生來代償。大量的心肌細胞死亡后由疤痕組織替代，導(dǎo)致局部的心肌收縮紊亂，心功能下降，最后導(dǎo)致充血性心衰。 細胞移植心肌成形術(shù)針對心衰的基本病理生理，通過將適當?shù)墓w細胞移植入受損的心肌內(nèi)，增加具有收縮功能的肌性細胞數(shù)目，改善心心室重構(gòu)，促進梗死區(qū)血管新生，是一種新的治療冠心病和心衰的方法。

2、 以貴州香豬為研究對象,提取分離標記自體骨髓單核細胞，建立香豬急性心肌梗死模型，分別在梗死區(qū)域內(nèi)經(jīng)心肌局部注射和經(jīng)結(jié)扎的冠狀動脈遠端注射自體骨髓單核細胞，研究急性心肌梗死后自體骨髓單核細胞移植的心肌再生效果及對梗死心肌的保護作用，為臨床應(yīng)用骨髓單核細胞治療心肌疾病提供試驗依據(jù)。全文共分四部分： 第一部分骨髓單核細胞移植誘導(dǎo)梗死心肌區(qū)域心肌再生的實驗研究。 目的: 研究骨髓單核細胞梗死心肌移植后的心肌再生作用。

3、方法: 貴州香豬24只，隨機分為對照組(C組)，實驗組(E組)。抽取骨髓液3ml，按照Ficoll密度剃度離心方法分離出骨髓單核細胞，PKH26 Red紅色熒光標記。開胸結(jié)扎左冠狀動脈前降支后，實驗組將熒光標記后的自體骨髓單核細胞分別經(jīng)結(jié)扎的左冠狀動脈前降支遠端和心肌內(nèi)注射，C組以PBS對照。術(shù)后3, 6周取心肌標本行免疫組化。 結(jié)果:梗死區(qū)域可觀察再生的心肌細胞，這些細胞能表達MHC, cTnT I。 結(jié)論:骨髓單核細

4、胞移植可促進梗死心肌區(qū)域內(nèi)心肌再生。 第二部分：骨髓單核細胞移植改善梗死心肌結(jié)構(gòu)及收縮力的實驗研究。 目的：探討骨髓單核細胞移植對梗死心肌基本結(jié)構(gòu)及心肌收縮力的影響。 方法: 貴州香豬24只，隨機分為對照組(C組)，實驗組(E組)。抽取骨髓液3ml，按照Ficoll密度剃度離心方法分離出骨髓單核細胞，PKH26 Red紅色熒光標記。開胸結(jié)扎左冠狀動脈前降支后，實驗組將熒光標記后的自體骨髓單核細胞分別經(jīng)結(jié)扎的左冠狀

5、動脈前降支遠端和心肌內(nèi)注射，C組以PBS對照。術(shù)后3， 6周取標本，組織切片染色觀察組織基本結(jié)構(gòu)和體外藥物刺激離體肌條檢測心肌收縮情況。 結(jié)果：實驗組與對照組比較，VG染色顯示膠原纖維融合較少，組織結(jié)構(gòu)排列基本處于有序狀態(tài)。實驗組心肌收縮力明顯高于對照組(P<0.001)，且隨時間推移恢復(fù)程度增加(P<0.05)。 結(jié)論：骨髓單核細胞移植對梗死心肌組織結(jié)構(gòu)起到保護作用，并可促進梗死心肌收縮力恢復(fù)。 第三部分骨髓單

6、核細胞移植促進梗死心肌區(qū)血管新生的實驗研究。 目的：研究骨髓單核細胞移植對梗死心肌血管新生的影響。 方法：貴州香豬24只，隨機分為對照組(C組)，實驗組(E組)。抽取骨髓液3ml，按照Ficoll密度剃度離心方法分離出骨髓單核細胞，PKH26 Red紅色熒光標記。開胸結(jié)扎左冠狀動脈前降支后，實驗組將熒光標記后的自體骨髓單核細胞分別經(jīng)結(jié)扎的左冠狀動脈前降支遠端和心肌內(nèi)注射，C組以PBS對照。術(shù)后3，6周取標本，免疫組化檢測