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文檔簡(jiǎn)介
1、目的: 研究非霍奇金淋巴瘤(non Hodgkin lymphoma,NHL)患者血清血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(serum vascular endothelial growth factor,sVEGF)及血清堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(serum basic fibroblast growth factor,sbFGF)水平與臨床特征的關(guān)系;探討抗血管生成藥物姜黃素對(duì)人非霍奇金淋巴瘤Raji細(xì)胞增殖及VEGF表達(dá)的影響,為臨床抗血管新生
2、治療提供理論依據(jù)。 方法: ELISA法檢測(cè)不同病期NHL患者sVEGF、sbFGF水平,并收集臨床資料,進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析;ELISA法檢測(cè)姜黃素對(duì)Raji細(xì)胞上清中VEGF含量變化的影響;不同濃度姜黃素(5umol/L、10umol/L、25umol/L、50umol/L)作用于Raji細(xì)胞24h、48h、72h后,WST-1法檢測(cè)姜黃素對(duì)細(xì)胞增殖的影響;倒置相差顯微鏡下觀察Raji細(xì)胞形態(tài)及生長(zhǎng)情況:Annexin-V
3、/PI雙標(biāo)流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)Raji細(xì)胞凋亡率。 結(jié)果: 1.NHL患者sVEGF水平 (1)NHL初治化療前36例,其sVEGF濃度為(443.59±203.48)pg/ml;正常對(duì)照組19例,其sVEGF濃度為(90.50±21.42)pg/ml,兩組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。 (2)化療后完全緩解(complete remission,CR)者17例,其sVEGF濃度為(96.34±38.84
4、)pg/ml;部分緩解(partial remission,PR)者11例,其sVEGF濃度為(109.54±46.37)pg/ml;復(fù)發(fā)進(jìn)展(palindromia,PD)者8例,其sVEGF濃度為(553.96±250.08)pg/ml,初治化療前sVEGF明顯高于CR者(P<0.01)、也高于PR者(P<0.05);PD者sVEGF比初治化療前稍高,但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.526>0.05)。 (3)第一療程達(dá)CR者9
5、例,其化療前sVEGF濃度為(152.11±57.98)pg/ml;未達(dá)CR者27例,其化療前sVEGF濃度為(540.75±124.45)pg/ml,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。 (4)比較36例初治化療前sVEGF與多個(gè)臨床相關(guān)因素的關(guān)系,結(jié)果顯示Ⅲ~Ⅳ期患者sVEGF水平高于Ⅰ~Ⅱ期者(P<0.05):高中?!呶=MsVEGF水平高于低?!椭形=M(P<0.05):LDH升高者sVEGF水平明顯高于LDH正常者(P<
6、0.05);β2-Mg升高者sVEGF水平明顯高于β2-Mg正常者(P<0.05):而sVEGF水平與性別、年齡、全身癥狀及結(jié)外病變數(shù)目均無(wú)顯著相關(guān)性(P均>0.05)。 2.NHL患者sbFGF水平 (1)NHL初治化療前36例,其sbFGF濃度為(314.47±132.01)pg/ml;正常對(duì)照組19例,其sbFGF濃度為(78.55±36.35)pg/ml,兩組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。 (2)化
7、療后CR者17例,其sbFGF濃度為(82.28±34.85)pg/ml:PR者11例,其sbFGF濃度為(126.21±61.02)pg/ml; PD者8例,其sbFGF濃度為(338.40±161.12)pg/ml。初治者sbFGF濃度明顯高于CR、PR者(P均<0.05); PD者sbFGF濃度比初治化療前稍高,但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.246>0.05)。 (3)第一療程達(dá)CR者9例,其化療前sbFGF濃度為(151.
8、14±35.09)pg/ml;未能達(dá)CR者27例,其化療前sbFGF濃度為(346.39±121.40)pg/ml,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。 (4)比較36例初治患者sbFGF與多個(gè)臨床相關(guān)因素的關(guān)系,結(jié)果顯示Ⅲ~Ⅳ期患者sbFGF水平高于Ⅰ~Ⅱ期者(P<0.05);高中危~高危組sbFGF水平高于低?!椭形=M(P<0.05); LDH升高者sbFGF水平明顯高于LDH正常者(P<0.05);β2-Mg升高者sbFG
9、F水平明顯高于β2-Mg正常者(P<0.05);而sbFGF水平與性別、年齡、全身癥狀及結(jié)外病變數(shù)目均無(wú)顯著相關(guān)性(P均>0.05)。 3.sVEGF與sbFGF的相關(guān)性 pearson相關(guān)分析表明sVEGF與sbFGF具有顯著正相關(guān)性(r=0.548,P<0.05)。 4.姜黃素對(duì)Raji細(xì)胞上清VEGF含量的影響 ELISA法檢測(cè)10、25umol/L姜黃素對(duì)Raji細(xì)胞作用24h后上清液中VEG
10、F含量的變化,結(jié)果顯示,對(duì)照組上清液中VEGF濃度為(707.92±55.92)pg/ml;而10、25umol/L姜黃素處理組細(xì)胞上清液中VEGF濃度分別為(369.73±14.22)pg/ml、(178.24±21.18)pg/ml,與對(duì)照組相比兩者均顯著性降低(P均<0.05)。 5.姜黃素處理Raji細(xì)胞后WST-1法檢測(cè)結(jié)果 Sumol/L姜黃素對(duì)Raji細(xì)胞無(wú)明顯抑制作用;10μmol/L、25μmol/L
11、、50μmol/L姜黃素對(duì)Raji細(xì)胞增殖有顯著抑制作用,呈濃度和時(shí)間依賴(lài)性。 6.姜黃素處理Raji細(xì)胞后形態(tài)變化 倒置相差顯微鏡下可見(jiàn)Raji細(xì)胞由成團(tuán)生長(zhǎng)變?yōu)閱蝹€(gè)散在,細(xì)胞數(shù)明顯減少,細(xì)胞體積變小,折光性減弱,有的細(xì)胞膜破裂,可見(jiàn)細(xì)胞碎片。 7.姜黃素對(duì)Raji細(xì)胞凋亡的影響 流式細(xì)胞儀檢測(cè)濃度為10、25umol/L姜黃素對(duì)Raji細(xì)胞凋亡的影響,結(jié)果示隨著姜黃素作用濃度及時(shí)間增加,細(xì)胞凋亡率隨之
12、增加。作用24h,Raji細(xì)胞凋亡率分別為11.12%、25.07%;作用48h,凋亡率分別為14.74%、33.50%;作用72h,凋亡率分別為25.11%、55.98%,均高于對(duì)照組1.75%、2.25%、2.77%的凋亡率(P均<0.01)。 結(jié)論: 1.NHL患者sVEGF、sbFGF水平顯著高于正常對(duì)照,并與臨床分期、IPI預(yù)后分組、LDH及β2-Mg有關(guān)。提示NHL的發(fā)病與血管新生有關(guān),且可聯(lián)合其他指標(biāo)一起作
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