表皮生長(zhǎng)因子受體酪氨酸激酶抑制劑吉非替尼對(duì)宮頸癌離體細(xì)胞的抑制和放射增敏作用研究.pdf

1、目的：1、研究表皮生長(zhǎng)因子受體酪氨酸激酶抑制劑吉非替尼對(duì)宮頸癌離體細(xì)胞的抑制作用及其作用機(jī)制； 2、探討吉非替尼對(duì)宮頸癌離體細(xì)胞的放射增敏作用及其作用機(jī)制。 方法：以宮頸鱗癌Siha細(xì)胞，腺癌Hela細(xì)胞為研究對(duì)象，利用MTT法檢測(cè)吉非替尼單藥使用以及與順鉑聯(lián)用分別對(duì)Siha和Hela細(xì)胞的增殖抑制作用。采用Burgi法分析聯(lián)合用藥的效果。將細(xì)胞分為4組：(1)空白對(duì)照組：不行吉非替尼和放射線干預(yù)；(2)單純放療組：分別

2、給予1、2、3、4、6和8Gy6MVX線照射；(3)單純吉非替尼組：吉非替尼(IC20)作用72小時(shí)；(4)吉非替尼+放療組：分別給予1、2、3、4、6和8Gy6MVX線照射后吉非替尼作用(IC20)72小時(shí)。利用集落形成實(shí)驗(yàn)檢測(cè)吉非替尼對(duì)宮頸癌Siha、Hela細(xì)胞的放射增敏效應(yīng)，計(jì)算放射增敏比(SER)。吉非替尼+放療組所得數(shù)據(jù)校正吉非替尼產(chǎn)生的細(xì)胞毒性。WesternBlot分析吉非替尼對(duì)宮頸癌Siha、Hela細(xì)胞P-Erk、P

3、-Akt、CyclinD1、bcl-xL表達(dá)的影響。流式細(xì)胞儀測(cè)定細(xì)胞周期分布和細(xì)胞凋亡率的變化。 結(jié)果：1、單獨(dú)使用吉非替尼能夠抑制Siha、Hela細(xì)胞的增殖，其IC50值分別是1.48umol/l，2.67umol/l，而且抑制作用呈劑量依賴性。 2、吉非替尼能增強(qiáng)順鉑對(duì)Siha、Hela細(xì)胞的抑制作用，Burgi修正公式所得Q值分別為1.06±0.03(Siha)，1.13±0.01(Hela)。 3、吉

4、非替尼作用于Siha、Hela細(xì)胞72h后，放射增敏比SER分別為1.693、1.228。 4、吉非替尼使Siha、Hela細(xì)胞中P-Erk、P-Akt、CyclinD1、bcl-xL蛋白的表達(dá)明顯減低。 5、吉非替尼使Siha、Hela細(xì)胞G0/G1期細(xì)胞比例逐漸增加，S期細(xì)胞比例逐漸減少，細(xì)胞凋亡率增加。單純照射組Siha、Hela細(xì)胞的凋亡比率分別為(9.43±0.04)％、(6.41±0.02)％，吉非替尼與放射

5、聯(lián)合組Siha、Hela細(xì)胞的凋亡比率分別為(11.74±0.03)％、(8.09±0.05)％。統(tǒng)計(jì)學(xué)分析顯示吉非替尼與放射聯(lián)合作用后的凋亡比率與單純放射組相比差別有顯著性意義(P＜0.05)。 結(jié)論：1、吉非替尼能夠抑制宮頸癌細(xì)胞的增殖，并且能夠增強(qiáng)順鉑對(duì)宮頸癌細(xì)胞的抑制作用，該抑制作用可能與其使腫瘤細(xì)胞停滯于G1期和誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞的凋亡有關(guān)。 2、吉非替尼對(duì)宮頸癌Siha、Hela細(xì)胞具有明顯的放射增敏作用，