IETM對大鼠肝肺綜合征形成過程中肺部NOS表達影響的動態(tài)研究.pdf

1、目的：探討腸源性內(nèi)毒素血癥對大鼠肝肺綜合征(Hepatopulmonarysyndrome，HPS)形成過程中肺部一氧化氮合酶表達的動態(tài)變化。 材料與方法：健康雄性Wistar大鼠，體重220-250g，共24只，隨機分為4組，正常對照組(control)給予正常飼料和自來水，模型組以摻入膽固醇的玉米面作飼料，膽固醇占飼料重量的0.5％(前2周的每千克飼料中含有200g豬油)，以30％酒精作為其唯一飲料。在實驗第一天脊背皮下注射

2、CCL4原液，按5ml/kg給予，以后每隔3天皮下注射40％CCL4(用玉米油稀釋)，按3ml/kg給予，分別于4周末、6周末、8周末處死動物，留取肝組織、肺組織標本、血標本，通過生化、放免、病理、免疫組化、RT-PCR等方法檢測相關(guān)指標。 結(jié)果：1.HPS成過程中所致的腸源性內(nèi)毒素血癥的動態(tài)觀察結(jié)果在HPS動物模型復(fù)制4周起，血漿內(nèi)毒素水平顯著升高，6周達到高峰，8周有所下降，但仍顯著高于正常水平。結(jié)果提示在HPS形成的過程中

3、伴隨存在IETM。 2.HPS形成過程中肺部一氧化氮合酶(nitricoxidesynthase，NOS)的動態(tài)觀察結(jié)果2.1肺組織誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(induciblenitricoxidesynthaseiNOS)和內(nèi)皮型一氧化氮合酶(endothelialnitricoxidesynthase，eNOS)蛋白表達的動態(tài)觀察結(jié)果，在HPS形成過程中，實驗第4周肺部iNOS和eNOS的蛋白表達顯著增高，在6周和8周時間點呈明顯

4、的持續(xù)上升趨勢； 2.2肺組織iNOS和eNOS基因表達的動態(tài)觀察結(jié)果，在HPS形成過程中肺部iNOS的基因表達逐漸增加，4周末即有升高，6周末繼續(xù)升高，到8周末達到高峰；eNOS的基因表達4周起也有增高，到8周達到高峰，兩者表達具有相似的規(guī)律。 3.TNF-α和ET-1對HPS形成過程中肺部iNOS和eNOS表達影響的結(jié)果TNF-α4周時顯著升高(與對照組比較p＜0.05)，6周與4周比有所下降，但仍顯著高于正常對照組

5、，8周升高并達到最高峰；ET-14周顯著下降(p＜0.05)，6周與4周比有所升高，但仍低于對照組，8周繼續(xù)升高達到最高峰。TNF-α水平與iNOS、eNOS蛋白和基因之間具有顯著相關(guān)性。 結(jié)論：1.HPS形成過程中，肝臟功能改變是肺功能變化的基礎(chǔ)；2.HPS形成過程中伴隨發(fā)生的IETM，可能是肝功能障礙導(dǎo)致HPS自發(fā)形成的關(guān)鍵；3.HPS形成過程中，IETM可能對肺部eNOS和iNOS的表達發(fā)揮重要的調(diào)節(jié)作用；4.IETM對肺