出血型與非出血型人腦動(dòng)靜脈畸形Notch1、Dll4、EphrinB4、EphB4、Ang2、Tie2因子的表達(dá)比較研究.pdf

1、目的:腦動(dòng)靜脈畸形(BAVM)是青少年致死、致殘的最常見(jiàn)的出血性腦血管病之一，其發(fā)生和破裂出血的機(jī)制與新生血管生成有關(guān)，血管生成受多種細(xì)胞因子的調(diào)控，但具體機(jī)制不清。文獻(xiàn)報(bào)道多種生成因子在BAVM中是呈高表達(dá)，其破裂出血的機(jī)制可能也與多種細(xì)胞因子密切相關(guān)，本研究Notch1/D114，EphrinB2/EphB4，Ang2/Tie2因子是否與BAVM破裂出血有相關(guān)性，在出血型與非出血型人腦動(dòng)靜脈畸形的表達(dá)上是否存在差異及在BAVM的表達(dá)

2、上是否存在相關(guān)關(guān)系，為BAVM的發(fā)生及出血機(jī)制提供相關(guān)線索，對(duì)BAVM疾病更有效的治療提供一定的理論基礎(chǔ)。
　　 方法:
　　 1.免疫組化:醫(yī)院病理科調(diào)取腦動(dòng)靜脈畸形蠟塊標(biāo)本52例（其中出血型腦動(dòng)靜脈畸形蠟塊標(biāo)本42例，未出血型10例），切5微米厚切片進(jìn)行Notch1，D114，EphrinB2，EphB4，Ang2，Tie2蛋白免疫組化染色，使用光鏡觀察BAVM的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)，用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理分析

3、在出血型與未出血型BAVM中Notch1，D114，EphrinB2，EphB4，Ang2，Tie2蛋白的表達(dá)是否有統(tǒng)計(jì)學(xué)上差異，并分析D114、Ang2、EphrinB2、EphB4在BAVM中的表達(dá)上是否有相關(guān)性。
　　 2.real-time PCR:出血型腦動(dòng)靜脈畸形團(tuán)標(biāo)本18例，未出血型5例（其中2例為新鮮畸形團(tuán)標(biāo)本，石蠟標(biāo)本中提取合格RNA3例）。用real-time PCR檢測(cè)兩組BAVM內(nèi)基因Notch1/D11

4、4，EphrinB2/EphB4，Ang2/Tie2基因的表達(dá)變化.SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件分析在出血型與未出血型BAVM中Notch1/D114，EphrinB2/EphB4，Ang2/Tie2基因的表達(dá)是否存在統(tǒng)計(jì)學(xué)上差異。
　　 3.WB分析:出血型腦動(dòng)靜脈畸形團(tuán)標(biāo)本18例，未出血型2例。出血型與未出血型BAVM中Notch1/D114，EphrinB2/EphB4，Ang2/Tie2蛋白的表達(dá)是否存在差異。
　　

5、 結(jié)果:
　　 1.免疫組化染色顯示:Notch1，D114，EphrinB2，EphB4，Ang2主要表達(dá)于BAVM血管內(nèi)皮細(xì)胞及平滑肌細(xì)胞，Tie2蛋白在BAVM中未見(jiàn)明顯表達(dá)，Notch1在兩組表達(dá)陽(yáng)性率的比較結(jié)果無(wú)顯著性差異的。D114，EphrinB2，EphB4,Ang2均有顯著性差異，在BAVM中D114分別與Ang2、EphrinB2及EphB4有一定的相關(guān)性，EphB4與Ang2相關(guān)，EphrinB2與Ang2

6、無(wú)明顯相關(guān)。
　　 2.real-time PCR檢測(cè)中D114，EphrinB2，EphB4，Ang2在出血性標(biāo)本表達(dá)的陽(yáng)性率均明顯高于非出血標(biāo)本，Tie2在出血性標(biāo)本表達(dá)的陽(yáng)性率均低于非出血標(biāo)本，其中D114，EphrinB2，EphB4，Ang2差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。Notch1在兩者間的表達(dá)無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 3..WB分析結(jié)果:D114，EphrinB2，EphB4，Ang2蛋白在出血型動(dòng)靜脈畸形表達(dá)的陽(yáng)性率均高