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文檔簡介
1、目的:
通過過繼轉(zhuǎn)移日本血吸蟲可溶性蟲卵抗原(Soluble Egg Antigen SEA)免疫小鼠樹突狀細(xì)胞(Dendritic cells,DC)亞群,探討SEA免疫的DC亞群在抑制過敏性哮喘中的作用及可能的作用機(jī)制。
方法:
BALB/c小鼠經(jīng)腹腔及足墊注射SEA50μg/只,每周1次,共4次。對照組注射生理鹽水(Normal Saline,NS)。用CD8α+磁珠和CD11c+磁珠分別分離小鼠脾C
2、D8α+DC與CD8αDC亞群。另取30只BALB/c小鼠,隨機(jī)分為6組:正常對照組、單純哮喘組、過繼轉(zhuǎn)移NS對照(NS-CD8α+DC)組、過繼轉(zhuǎn)移NS對照(NS-CD8αDC)組、過繼轉(zhuǎn)移SEA免疫CD8α+DC(SEA-CD8α+DC)組、過繼轉(zhuǎn)移SEA免疫CD8α-DC(SEA-CD8αDC)組。NS-CD8α+DC組、NS-CD8αDC組、SEA-CD8α+DC組、SEA-CD8αDC組小鼠分別經(jīng)尾靜脈過繼轉(zhuǎn)移CD8α+DC和
3、CD8αDC5×105個/只小鼠。1h后單純哮喘組、NS-CD8α+DC組、NS-CD8α-DC組、SEA-CD8α+DC組、SEA-CD8α-DC組小鼠同時用卵白蛋白(OVA)誘發(fā)哮喘,4周后剖殺,取肺組織做病理切片和免疫組化染色,觀察炎癥變化,檢測肺組織IL-13Rα2和CCL-11表達(dá)情況。
結(jié)果:
(1)肺組織病理切片HE染色結(jié)果顯示,與單純哮喘組、NS-CD8α+DC組、NS-CD8αDC組、SEA-CD8
4、α+DC組相比,SEA-CD8α-DC組小鼠肺組織炎癥明顯減輕。
(2)各組小鼠肺組織IL-13Rα2平均光密度值分別為:正常對照組0.1029±0.0103,單純哮喘組0.3136±0.0174,NS-CD8α+DC組0.3241±0.0209,NS-CD8αDC組0.3061±0.0167,SEA-CD8α+DC組0.3263±0.0128,SEA-CD8αDC組0.1859±0.0294;各組小鼠肺組織IL-13Rα2陽
5、性區(qū)域占血管、氣管總面積的百分比分別為:正常對照組0.0144±0.0038,單純哮喘組0.2638±0.0123,NS-CD8α+DC組0.1814±0.0159,NS-CD8α-DC組0.2662±0.0404,SEA-CD8α+DC組0.2324±0.0459,SEA-CD8αDC組0.1004±0.0231。與單純哮喘組、NS-CD8α+DC組、NS-CD8αDC組和SEA-CD8α+DC組相比較,SEA-CD8α-DC組小鼠肺
6、組織IL-13Rα2平均光密度值明顯低于其它四組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。
(3)各組小鼠肺組織CCL-11平均光密度值分別為:正常對照組0.1496±0.0009,單純哮喘組1.9455±0.4994,NS-CD8α+DC組1.7991±0.0962,NS-CD8α-DC組2.1339±0.4709,SEA-CD8α+DC組0.9631±0.1201,SEA-CD8αDC組0.3458±0.0543;各組小鼠肺組織
7、CCL-11陽性區(qū)域面積占血管、氣管總面積的百分比分別為:正常對照組0.0012±0.0009,單純哮喘組0.2656±0.0382,NS-CD8α+DC組0.2844±0.0244,NS-CD8α-DC組0.2994+0.0261,SEA-CD8α+DC組0.1422±0.0337,SEA-CD8αDC組0.0354+0.0202。與單純哮喘組、NS-CD8α+DC組、NS-CD8α-DC組和SEA-CD8α+DC組相比較,SEA-C
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