尾靜脈注射a-MSH對大鼠重度燙傷后早期炎癥反應(yīng)的影響.pdf

1、 目的：通過建立大鼠重度燙傷模型,探討尾靜脈注射 a 黑素細(xì)胞刺激素(a-MSH)對燙傷引起的全身及局部創(chuàng)面早期炎癥反應(yīng)的影響,探索a-MSH在降低燙傷炎癥反應(yīng)中的作用機(jī)制。方法：18只成年SD大鼠,雌雄不限,隨機(jī)分為3組(每組6只)其中1個治療組(A組)和2個對照組(B組、C組)。用蒸餾水將α-MSH配成濃度為1mg/ml溶液。A組治療組為大鼠燙傷后尾靜脈注射α-MSH溶液1ml/(kg·d),連續(xù)注射3天。B組對照組大鼠燙傷后尾靜

2、脈注射生理鹽水溶液 1ml/(kg·d),連續(xù)注射 3 天。C組空白對照組為正常未燙傷大鼠。建立大鼠重度燙傷模型后首先以 24h、48h、72h三個觀察時間點肉眼觀察記錄燙傷創(chuàng)面情況、皮膚痂皮形成、溶解及脫落時間；其次以6h、12h、24h、48h、72h五個觀察時間點,采集相應(yīng)觀察時間點靜脈血液1-2ml,通過ELISA法測定細(xì)胞因子IL-10、TNF-a水平變化；最后處死大鼠并分別取創(chuàng)緣組織創(chuàng)面皮膚病理切片HE染色觀察創(chuàng)面組織病理變

3、化。實驗數(shù)據(jù)以均值±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示。采用SPSS19.0統(tǒng)計軟件分析,細(xì)胞因子水平表達(dá)均采用單因素方差分析。結(jié)果：(1)A組和B組燙傷后創(chuàng)面均充血,水腫明顯,燙傷后24h,48h,72h皮膚顏色逐漸形成變暗,逐漸結(jié)痂。肉眼觀察A組創(chuàng)面黑色焦痂較B組治療組少,局部炎癥反應(yīng)較輕。(2)A、B 兩組燙傷后 IL-10 表達(dá)量隨著燙傷時間延長呈先升高后降低的趨勢,且均在燙傷后24h表達(dá)量最高,且與空白對照組相比均升高。C組空白對照組IL-

4、10表達(dá)量在不同時間無明顯統(tǒng)計學(xué)差異。燙傷后6h、12h、24h、48h、72h,A組a-msh治療組IL-10表達(dá)量均高于B組生理鹽水對照組和C組空白對照組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。燙傷后6h、12h、24h、48、72hB組生理鹽水對照組IL-10表達(dá)量均高于C組空白對照組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。燙傷后 6h、12h、24h、48h、72h,5個時相點A組a-msh治療組IL-10表達(dá)量分別為：(44.26±

5、2.15) pg/ml、(49.79±1.61) pg/ml、(174.44±4.38)pg/ml、(131.37 ±2.51)pg/ml、(82.50±2.38)pg/ml；B組IL-10表達(dá)量分別為：(29.30 ±1.38)pg/ml、(36.24±1.07)pg/ml、(102.29±1.87)pg/ml、(93.08 ±3.46)pg/ml、(58.88±1.60)pg/ml；C組IL-10表達(dá)量分別為：(26.45 ±0.9

6、7 )pg/ml、(28.58±1.07)pg/ml、(28.85±0.81)pg/ml、(29.28 ±1.35)pg/ml、(30.66±1.08) pg/ml。(3)A、B 兩組燙傷后 TNF-a表達(dá)量與 C 組空白對照組相比均隨著燙傷時間延長呈先逐漸升高趨勢。C組空白對照組TNF-a表達(dá)量在不同時間無明顯統(tǒng)計學(xué)差異。燙傷后6h、12h、24h、72h、96h A組a-msh治療組TNF-a表達(dá)量均低于B組生理鹽水對照組,差異有統(tǒng)

7、計學(xué)意義( P<0.05 )。燙傷后 6h、12h、24h、72h、96h B組生理鹽水對照組IL-10表達(dá)量均高于C組空白對照組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。燙傷后6h、12h、24h、72h、96h,5個時相點A組a-msh治療組TNF-a表達(dá)量分別為：(33.43±2.57)pg/ml、(37.25±3.55)pg/ml、(75.78±3.05)pg/ml、(91.75±4.87)pg/ml、(130.31±4.23)pg/

8、ml；B組生理鹽水對照組TNF-a表達(dá)量分別為：(49.30±4.60)pg/ml、(58.99 ±1.77)pg/ml、(132.11±2.89)pg/ml、(132.65±6.82)pg/ml、(169.84±3.97)pg/ml；C 組空白對照組 TNF-a 表達(dá)量分別為：(34.39±1.12) pg/ml、(33.94±1.74)pg/ml、(35.60±2.16)pg/ml、(34.61±2.13) pg/ml、(33.34

9、±2.06)pg/ml。(4)A、B組大鼠燙傷72h后燙傷皮膚組織HE染色鏡下觀察對比顯示,B組局部血管擴(kuò)張明顯,大量細(xì)胞水腫、壞死,炎癥細(xì)胞浸潤。A 組血管擴(kuò)張,細(xì)胞水腫、壞死,炎癥細(xì)胞浸潤等程度較B組輕。結(jié)論： a-MSH通過促進(jìn)抗炎癥細(xì)胞因子IL-10水平,抑制燙傷后機(jī)體炎癥細(xì)胞因子TNF-a水平,明顯減輕了早期全身炎癥反應(yīng),同時明顯減輕了組織水腫,壞死,創(chuàng)緣紅腫等局部炎癥反應(yīng),與對照組相比差異有統(tǒng)計學(xué)意義。因此推斷a-MSH可用