2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、宮頸癌是婦女常見的惡性腫瘤,隨著我國開展宮頸癌的篩查,特別是對宮頸癌的癌前病變一宮頸上皮內(nèi)瘤變(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)的診斷和及時(shí)治療,使宮頸癌的總體發(fā)病率有所下降。宮頸上皮內(nèi)瘤變CIN指的是宮頸癌前病變至原位癌的連續(xù)過程,依據(jù)宮頸上皮細(xì)胞不典型增生的程度分為Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ級(jí)。CIN的自然病程可能有3種結(jié)局,即病變消退、維持不變和病變進(jìn)展。由于12~50%未經(jīng)治療的重度宮頸癌前病變能進(jìn)

2、一步發(fā)展成為浸潤癌,目前臨床僅僅根據(jù)形態(tài)學(xué)改變無法判定究竟哪種癌前病變可能消退,進(jìn)展或持續(xù)存在,因此,如果使用某種特異的分子生物學(xué)指標(biāo)能夠輔助判定宮頸癌前病變的轉(zhuǎn)歸,對于臨床采用不同的治療手段將有重要的指導(dǎo)價(jià)值。鈣黏附素(E-cadherin,E-cad)和β-連接素(β-catenin,β-cat)是調(diào)節(jié)細(xì)胞與細(xì)胞之間、細(xì)胞與基質(zhì)之間粘附反應(yīng)的重要媒介,對維持組織結(jié)構(gòu)形態(tài)起重要作用。研究已顯示,E-cadherin和β-catenin

3、蛋白表達(dá)在多種上皮性惡性腫瘤中下調(diào)或缺失,與腫瘤的發(fā)生、浸潤、轉(zhuǎn)移等密切相關(guān),也與宮頸癌的分化的浸潤關(guān)系密切。關(guān)于E-cadherin和β-catenin與CIN進(jìn)展間的關(guān)系,雖然有研究顯示E-cadherin和β-catenin在CIN各級(jí)中表達(dá)下降,認(rèn)為其與CIN進(jìn)展有關(guān),但其在CIN各級(jí)中的表達(dá)情況還有待在臨床中進(jìn)一步的明確,為最終明確其在CIN進(jìn)展中的作用提供依據(jù)。本課題應(yīng)用免疫組化方法,觀察E-cadherin和β-caten

4、in在CIN各級(jí)表達(dá)情況,了解E-cadherin和β-catenin與CIN進(jìn)展間的關(guān)系,為臨床判斷CIN的潛在惡性程度提供指標(biāo)。研究目的觀察鈣黏附素(E-cad)和β-連接素(β-cat)在宮頸上皮內(nèi)瘤變組織中的表達(dá),探討其與宮頸上皮內(nèi)瘤變進(jìn)展的關(guān)系。 材料與方法 1.研究對象 選取深圳市第五人民醫(yī)院2005年12月~2006年12月經(jīng)電子陰道鏡檢查,宮頸活檢組織標(biāo)本51例。所有病例13種高危人乳頭瘤病毒HP

5、V檢測(第二代雜交捕獲法,Hybrid Capture Ⅱ)陽性,年齡28~49歲,中位年齡34歲。其中柱狀上皮移位(columnar ectopy)10例、CINⅠ級(jí)9例、CIN Ⅱ級(jí)18例、CIN Ⅲ級(jí)14例。所有病例術(shù)前均未實(shí)行放化療或?qū)m頸物理治療,資料完整,且經(jīng)病理證實(shí)。全部標(biāo)本經(jīng)10%福爾馬林固定,石蠟包埋。 2.檢測試劑 E-Cadherin (4A2C7)、Catenin (CAT-5H10) 單克隆抗體(

6、即用型),通用型SP試劑盒(即用型)、DAB試劑盒均購自北京中杉金橋公司,采用微波抗原修復(fù) (pH8.0枸櫞緩沖液)。 3.實(shí)驗(yàn)方法 臨床收集宮頸活檢組織標(biāo)本,應(yīng)用免疫組織化學(xué)方法檢測E-Cadherin和β -atenin蛋白的表達(dá)。采用S-P法染色,切片常規(guī)脫蠟水化后,加入過氧化物酶阻斷溶液阻斷內(nèi)源性過氧化物酶的活性,抗原修復(fù)后加入第一抗體,4℃冰箱過夜后,加入生物素標(biāo)記的第二抗體,室溫下孵育后再加入鏈霉素抗

7、生物素蛋白-過氧化物酶溶液,DAB顯色,蘇木素復(fù)染,脫水、透明、封片。用PBS代替一抗作陰性對照;分別用已知陽性的結(jié)腸癌組織切片作陽性對照。 4.結(jié)果的判定采用免疫組織化學(xué)S-P法,用結(jié)腸黏膜組織切片作為陽性對照,PBS液代替一抗作為陰性對照,DAB顯色。光鏡下觀察并攝片,陽性標(biāo)準(zhǔn)為細(xì)胞膜上、細(xì)胞質(zhì)或細(xì)胞核內(nèi)出現(xiàn)棕色顆粒。 正常表達(dá)為膜表達(dá),在膜上或膜質(zhì)同時(shí)表達(dá),且陽性細(xì)胞面積大于觀察面積的80%為正常表達(dá)。異位表達(dá)包括

8、胞質(zhì)型、異質(zhì)型,異常表達(dá)有胞質(zhì)型、異質(zhì)型表達(dá)及表達(dá)缺失。 陽性信號(hào)采用圖像分析儀進(jìn)行定量分析。每張切片在光鏡下取5個(gè)高倍視野,輸入計(jì)算機(jī),經(jīng)病理圖文分析系統(tǒng)測量其平均光密度值(A),通過平均光密度的數(shù)值來比較其表達(dá)強(qiáng)度的高低。 5.統(tǒng)計(jì)學(xué)分析數(shù)據(jù)采用SPSS12.0統(tǒng)計(jì)軟件處理,實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)符合正態(tài)分布者采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示,進(jìn)行方差齊性檢驗(yàn),多組間均數(shù)比較采用單因素方差分析,兩組間比較采用最小顯著差異法(LSD,

9、Least-significant Differel3ce)檢驗(yàn),非正態(tài)數(shù)據(jù)兩組間比較采用Wilcoxon秩和檢驗(yàn),采用Pearson直線相關(guān)進(jìn)行相關(guān)分析,取P<0.05為檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果 1.E-cadherin在柱狀上皮移位組及宮頸上皮內(nèi)瘤變組織中的表達(dá)E-cadherin在柱狀上皮移位組織、各級(jí)宮頸上皮內(nèi)瘤樣病變組織中的陽性表達(dá)率分別為80%、66.7%和55.6%、42.9%,即從柱狀上皮移位→CIN Ⅰ級(jí)→

10、CIN Ⅱ級(jí)-CINⅢ級(jí),E-cadherin的表達(dá)陽性率呈遞減趨勢,其差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。 E-cadherin在柱狀上皮移位組及CIN Ⅰ組、CIN Ⅱ組、CIN Ⅲ組中的平均光密度值(A)分別為:0.0866±0.0392、0.073±0.0122、0.0467±0.0056、0.0396±0.0097。E-cadherin的表達(dá)在柱狀上皮移位組、不同級(jí)別宮頸CIN組織中的平均光密度值差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P值<0.05

11、),組間比較柱狀上皮移位組高于CINⅡ~Ⅲ級(jí)組; CIN Ⅰ級(jí)組高于CIN Ⅱ~Ⅲ級(jí)組,差異均有顯著性意義(P值均<0.05);柱狀上皮移位組與CIN Ⅰ級(jí)組差異不顯著;CIN Ⅱ級(jí)組與CINⅢ級(jí)組差異不顯著(P值均>0.05)。 2.β-catenin在柱狀上皮移位組織及宮頸上皮內(nèi)瘤變組織中的表達(dá)β-catenin在柱狀上皮移位組織、CIN各級(jí)組織中的陽性表達(dá)率分別為90%、77.8%和61.1%、50.0%,即從柱狀上皮移位

12、→CIN Ⅰ級(jí)→CIN Ⅱ級(jí)→CINⅢ級(jí),E-cad的表達(dá)陽性率呈遞減趨勢,其差異有顯著性(P<0.05)。 β-catenin在柱狀上皮移位組及CIN Ⅰ組、CIN Ⅱ組、CIN Ⅲ組中的平均光密度值(A)分別為:0.1101±0.0116、0.1016±0.0108、0.0711±0.0062、0.0515±0.0091。β-catenin的表達(dá)在柱狀上皮移位組、不同級(jí)別宮頸CIN組織中的平均光密度值(A)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(

13、P值<0.05),組間比較柱狀上皮移位組高于CIN Ⅱ~Ⅲ級(jí)組; CIN Ⅰ級(jí)組高于CIN Ⅱ~Ⅲ級(jí)組,差異均有顯著性意義(P值均<0.05);柱狀上皮移位組與CIN Ⅰ級(jí)組差異不顯著;CIN Ⅱ級(jí)組與CINⅢ級(jí)組差異不顯著(P值均>0.05)。 3、鈣黏附素和β-連接素在宮頸組織中表達(dá)的相關(guān)性柱狀上皮移位組、CIN Ⅰ級(jí)、CIN Ⅱ級(jí)、CINⅢ級(jí)中,鈣黏附素和β-連接素的表達(dá)均呈下降趨勢,二者的平均光密度值(A)正相關(guān)(r=2

14、.546,P=0.018<0.05)。鈣黏附素及β-連接素在宮頸組織中表達(dá)的有相關(guān)性。 結(jié)論 1、從柱狀上皮移位→宮頸上皮內(nèi)瘤變Ⅰ級(jí)→宮頸上皮內(nèi)瘤變Ⅱ級(jí)→宮頸上皮內(nèi)瘤變Ⅲ級(jí)這一過程中,鈣黏附素的表達(dá)逐漸下降,鈣黏附素表達(dá)下調(diào)與宮頸癌前病變進(jìn)展相關(guān)。 2、β-連接素在柱狀上皮移位→宮頸上皮內(nèi)瘤變Ⅰ級(jí)→宮頸上皮內(nèi)瘤變Ⅱ級(jí)→宮頸上皮內(nèi)瘤變Ⅲ級(jí)中的表達(dá)呈遞減趨勢,其表達(dá)下調(diào)與宮頸癌前病變進(jìn)展相關(guān)。 3、鈣黏附素、

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