小麥光腥黑粉菌（Tilletia foetida）AFLP分析及其種的特異性SCAR標記的發(fā)掘.pdf

1、小麥是世界各國主要糧食作物之一，是我國第二大糧食作物。小麥光腥黑穗病(commonbuntofwheat)是小麥生產(chǎn)上的一種毀滅性病害。該病發(fā)生歷史久遠，分布廣泛，流行性強，危害嚴重。傳統(tǒng)的病害診斷、檢測方法主要是依據(jù)病原形態(tài)學、生理學和病害癥狀特性，不但過程繁瑣、時間周期長，而且準確性差、精度不高。因此，研究開發(fā)快速、準確的病害分子診斷、檢測技術，對于防止該病害的傳播和蔓延，確保我國小麥安全生產(chǎn)具有重要的理論意義和應用價值?！　”卷?/p>

2、研究從美國及國內收集了小麥光腥黑粉菌5個菌株、小麥網(wǎng)腥黑粉菌3個菌株和小麥矮腥黑粉菌、玉米絲黑穗菌、小麥散黑穗菌等小麥光腥黑粉菌部分近緣種的冬孢子標樣，分析比較了改良CTAB法、氯化芐法和SDS法從病原物冬孢子中提取基因組DNA，通過比較，最終建立了黑粉菌冬孢子總DNA提取的SDS法，該方法可以從病原菌微量冬孢子中成功提取基因組DNA?！　”驹囼灢捎肁FLP分子標記技術，通過對各種供試黑粉菌菌株的基因組DNA進行酶切、連接、預擴增、選

3、擇性擴增和銀染檢測，共篩選了132對AFLP引物組合，獲得了其中一對引物組合(M09/E04)，可擴增出小麥光腥黑粉病菌種的特異性條帶。經(jīng)多次重復驗證表明：該引物組合對所有供試的小麥光腥黑粉病菌5個菌株均可擴增出特異性DNA片段，而在小麥網(wǎng)腥黑粉病菌、小麥矮腥黑粉病菌、玉米絲黑穗病菌和小麥散黑穗病菌等近緣種中，則未擴增出該DNA片段。通過對該目的片斷的回收、純化、克隆和序列測定，表明該特異性DNA片段大小為286bp。本實驗結果為小麥光