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文檔簡介
1、狂犬病(Rabies)是由狂犬病病毒(rabies virus,RABV)引起的人獸共患病,可以感染所有哺乳動物,其死亡率接近100%。內(nèi)蒙古自治區(qū)既往一直是狂犬病低發(fā)或無病例報告的地區(qū),但從2007年至2014年,出現(xiàn)了30多例動物感染狂犬病的病例;2011年內(nèi)蒙古自治區(qū)人狂犬病報告病例高達(dá)12例。本研究于2009-2012年間在內(nèi)蒙古自治區(qū)收集了22份疑似狂犬病的動物腦組織樣本,對其進(jìn)行RT-PCR檢測,共檢出16份陽性樣本。將22
2、份疑似狂犬病的動物腦組織研磨離心后,取上清液腦內(nèi)接種BALB/c小鼠,成功分離出16株狂犬病病毒株。
RT-PCR擴(kuò)增測序后獲得16株狂犬病病毒全基因組序列,對分離的16株狂犬病病毒株進(jìn)行N基因、G基因和全基因遺傳進(jìn)化分析,結(jié)果表明16株分離株均屬于基因Ⅰ型,分離株NM5、NM8、NM13和NM16屬于Cosmopolitan譜系,其余12株分離株屬于Asian譜系,推測這兩大譜系為內(nèi)蒙古狂犬病主要流行譜系。屬于Asian譜系
3、的12株分離株與離近省份(北京、山西、河北)分離株BeijingHu1、Shananxi-BZ-6、HeBei0N基因核苷酸相似性高達(dá)98.8%~99.9%;屬于Cosmopolitan譜系的4株分離株與鄰近國家蒙古國、俄羅斯分離株Mongolia3、3502fN基因核苷酸相似性分別在99.0%-99.1%和97.8%-98.0%。
16株狂犬病病毒分離株的5個結(jié)構(gòu)蛋白編碼區(qū)大小、重要功能基序以及重要功能位點比較保守,但部分位
4、點仍有氨基酸突變。16株分離株N-P非編碼區(qū)以及P-M非編碼區(qū)的長度不同,屬于Asian譜系的12株分離株N-P非編碼區(qū)、P-M非編碼區(qū)長度分別為91 nt和87 nt,屬于Cosmopolitan譜系的4株分離株N-P非編碼區(qū)、P-M非編碼區(qū)長度分別為90 nt和88 nt??袢〔《痉蛛x株NM11、NM12、NM14和NM15在N蛋白第375位次要磷酸化位點處由蘇氨酸變?yōu)橘嚢彼幔チ姿峄稽c。將16株分離株與疫苗株的G蛋白主要抗原
5、位點進(jìn)行比較,結(jié)果表明屬于亞洲Asian譜系12株分離株與疫苗株存在G蛋白抗原位點Ⅲ V332I差異,屬于Cosmopolitan譜系4株分離株與疫苗株存在G蛋白抗原位點Ⅱ T36A差異。
在疫苗保護(hù)實驗中,ERA(Cosmopolitan譜系)疫苗免疫BALB/c小鼠對分離株NM4(Asian譜系)和NM8(Cosmopolitan譜系)的攻擊均能提供有效保護(hù),保護(hù)率為100%,初步證實了目前獸用ERA疫苗能有效地保護(hù)動物對
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