CD154在膀胱移行細(xì)胞癌中的表達(dá)及其對(duì)腫瘤生長(zhǎng)影響的實(shí)驗(yàn)研究.pdf_第1頁(yè)
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1、目的:研究CD154在膀胱移行細(xì)胞癌(TCC)中的表達(dá)及其與腫瘤臨床分期和病理分級(jí)之間的關(guān)系,并通過(guò)體外細(xì)胞培養(yǎng)以及小鼠膀胱腫瘤模型研究CD154的表達(dá)對(duì)膀胱TCC成瘤性的影響.方法:1.收集臨床病理標(biāo)本,應(yīng)用免疫組化SP法檢測(cè)CD154在10例正常膀胱上皮和56例膀胱TCC中的表達(dá),分析其表達(dá)強(qiáng)弱與臨床分期和病理分級(jí)之間的相關(guān)性.2.分離小鼠脾臟淋巴細(xì)胞,以植物血凝素刺激CD154的表達(dá),提取CD154 mRNA,RT-PCR擴(kuò)增CD

2、154 cDNA,經(jīng)HindШ和Xho Ⅰ雙酶切后連接于pcDNA3.1/Zeo(+)質(zhì)粒,構(gòu)建小鼠CD154真核表達(dá)質(zhì)粒.以陽(yáng)離子脂質(zhì)體jetPEI介導(dǎo)該質(zhì)粒轉(zhuǎn)染小鼠膀胱TCC細(xì)胞系BTT739細(xì)胞,經(jīng)Zeocin篩選出穩(wěn)定表達(dá)CD154的細(xì)胞株BTT739-CD154,采用同樣方法篩選pcDNA3.1/Zeo(+)空質(zhì)粒穩(wěn)定表達(dá)細(xì)胞株BTT739-pcDNA3.1/Zeo(+).3.體外培養(yǎng)BTT739細(xì)胞、BTT739-CD154

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