NF-kB特異性抑制劑PDTC對急性肝衰竭小鼠肝細(xì)胞DNA損傷的影響.pdf

1、目的：觀察NF-kB特異性抑制劑二硫氨基甲酸酞吡咯烷對急性肝衰竭小鼠血清TNF-a濃度梯度及肝細(xì)胞DNA損傷的影響，并探討其可能的機(jī)制。
　　 方法：(1)分組并建立急性肝衰竭小鼠模型：正常SPF 級雄性昆明小鼠65只,隨機(jī)分為3 大組：正常對照組，D-Gal/L PS模型組,二硫氨基甲酸酞吡咯烷(PDTC)干預(yù)組，每大組按時(shí)間順序(0.5h 1h 2h 4h 8h 12h)又隨機(jī)分6個(gè)小組。(2)不同時(shí)間點(diǎn)取材和檢測:模型組與

2、干預(yù)組于各個(gè)時(shí)間點(diǎn)處死小鼠，檢測ALT，用ELISA法檢測血清TNF-a濃度,蘇木-伊紅染色觀察肝臟組織損傷情況以對造模效果評估，用彗星實(shí)驗(yàn)觀察小鼠肝細(xì)胞DNA的損傷情況。
　　 結(jié)果：(1) 肉眼見模型組肝臟腫脹，表面蒼白，失去光澤，肝臟包膜可見見散在點(diǎn)狀出血，質(zhì)偏硬。光鏡下對照組肝臟組織結(jié)果正常，模型組肝臟組織發(fā)生明顯病理變化，而干預(yù)組則組織損傷比模型組較輕。(2)對照組肝功能正常，模型組在腹腔注射后2h血清轉(zhuǎn)氨酶明顯升高(

3、P<0.05)，4h 達(dá)峰值，8h 開始下降，12小時(shí)仍在較高水平。干預(yù)組與模型組2h，4h，8h，12h點(diǎn)相比血清轉(zhuǎn)氨酶降低(P<0.05)。(3)模型組1h血清TNF-a較正常組開始升高(P<005)，2h小時(shí)達(dá)到峰值，4小時(shí)已經(jīng)下降，8小時(shí)仍持續(xù)在較高水平。干預(yù)組血清2h，4h，8h后TNF-a比模型組降低(P<005)。(4)0.5h后，模型組肝細(xì)胞DNA Olive尾矩值有明顯增大，1 h出現(xiàn)細(xì)胞DNA損傷的肝細(xì)胞達(dá)100[％

4、]，且Olive尾矩值增大更顯著；隨注射時(shí)間推移，肝細(xì)胞DNA Olive尾矩值逐漸增加。干預(yù)組1h，2h，4h，8h,12h后肝細(xì)胞DNA Olive尾矩值于模型組相比均有不同程度的降低，4h的降低幅度尤為明顯，而0.5h時(shí)模型組和干預(yù)組相比差別沒有顯著意義。
　　 結(jié)論：本實(shí)驗(yàn)研究提示PDTC可能通過抑制NF-κB過度激活,減少了TN F-a等前炎癥介質(zhì)或細(xì)胞因子過度產(chǎn)生,在一定程度上能減輕了肝細(xì)胞DNA的損傷，減緩LPS/