新型硬脂酰胺神經(jīng)保護劑的合成及其藥理活性研究.pdf

1、缺血性腦中風以其高發(fā)病率、高致死率和高致殘率嚴重地危害著人類健康,已成為現(xiàn)代醫(yī)學迫切需要解決的難題之一。因此開展對腦損傷具有神經(jīng)保護作用的藥物研究,對于缺血性腦中風的治療具有重要意義。本課題設(shè)計合成了一系列新型的硬脂酰胺及其類似物,采用大鼠腦片缺氧缺糖(OGD)損傷模型篩選了它們對缺血性腦損傷的神經(jīng)保護活性。結(jié)果表明,硬脂酰氨基酸(10μmol/L,)能提高腦片OGD損傷后的組織活性。其中硬脂酰酪氨酸(NSTyr)和硬脂酰絲氨酸(NSS

2、er)在濃度1～10μmol/L范圍內(nèi)可劑量依賴性地減少OGD損傷引起的皮層和海馬腦片組織活性的降低。同時我們還根據(jù)腦片OGD損傷篩選結(jié)果,初步探討了具有神經(jīng)保護作用的硬脂酰胺的構(gòu)效關(guān)系。實驗發(fā)現(xiàn),硬脂酰胺的神經(jīng)保護活性可能與結(jié)構(gòu)中的硬脂酰基長度、氨基酸殘基上的羥基及羧基的存在有關(guān),而與其絕對構(gòu)型的變化無關(guān)。我們采用不同的腦缺血損傷模型,研究了NSTyr和NSSer的體內(nèi)外神經(jīng)保護作用。發(fā)現(xiàn)NSTyr或NSSer能明顯提高沙土鼠短暫前腦

3、缺血海馬CA1區(qū)神經(jīng)元的存活率,減輕神經(jīng)元凋亡。免疫組織化學實驗發(fā)現(xiàn),NSTyr能明顯降低海馬CA1區(qū)Bax免疫反應(yīng)陽性細胞數(shù)。腦片實驗顯示,NSTyr或NSSer對1 mmol/L谷氨酸造成的腦片損傷無明顯保護作用,但可顯著減輕2 mmol/L H2O2對腦片的損傷作用。細胞學實驗也表明,NSTyr或NSSer不能明顯提高谷氨酸誘導損傷的皮層神經(jīng)元的存活率；但1～20μmol/L的NSTyr或NSSer能對抗PC12細胞的OGD或氧應(yīng)

4、激損傷,該結(jié)果和腦片損傷保護的實驗結(jié)果一致。我們利用H2O2誘導的PC12細胞損傷模型,觀察了多種信號通路阻斷劑對NSTyr和NSSer的神經(jīng)保護作用的影響,我們發(fā)現(xiàn)NSTyr和NSSer的神經(jīng)保護作用可能與激活EKR1/2通路有關(guān),而酪氨酸激酶、PI3K通路可能參與了ERK1/2通路的激活。流式細胞儀檢測發(fā)現(xiàn),10μmol/L的NSTyr或NSSer可顯著減輕100μmol/L H2O2誘導的PC12細胞凋亡；10μmol/L的NST