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1、本文以優(yōu)質(zhì)高產(chǎn)雜交油菜新品種“蜀雜九號”恢復(fù)系材料84100-18(BrassicanapuaL.)油菜品系為受體材料,分析討論了預(yù)培養(yǎng),苗齡,激素濃度等影響油菜遺傳轉(zhuǎn)化體系的因素。并通過農(nóng)桿菌(Agrobacteriumtumefaciens)Ti質(zhì)粒介導途徑,將抗除草劑基因EPSPs轉(zhuǎn)入甘藍型油菜,經(jīng)過誘導和分化獲得轉(zhuǎn)基因草甘膦抗性植株,并進行PCR檢測以及Southern-blot檢測,并對T0和T1代抗性植株進行抗性檢測和育性試
2、驗。主要實驗結(jié)果如下: 1.建立并優(yōu)化了油菜植株的再生體系。 2.確定農(nóng)桿菌EHA105轉(zhuǎn)化油菜外植體的最佳條件。 3.轉(zhuǎn)化后經(jīng)卡那霉素和草甘膦篩選獲得了油菜抗性苗,通過PCR驗證,初步證明得到了含外源EPSPs基因的轉(zhuǎn)基因植株。 4.四株P(guān)CR陽性植株經(jīng)Southern雜交驗證,證明有三株為含外源基因的轉(zhuǎn)基因植株。 5.為了檢驗轉(zhuǎn)EPSPs基因油菜的對草甘膦的抗性,我們對陽性植株(T0)進行了葉
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