農(nóng)桿菌介導(dǎo)蘋果轉(zhuǎn)化AtGAI基因的研究.pdf

1、果樹轉(zhuǎn)基因中存在的問題除了轉(zhuǎn)基因沉默和外源基因不能在果樹生命周期中穩(wěn)定表達(dá)外，一個重要的限制因子是轉(zhuǎn)化效率低，植株再生困難。為了優(yōu)化蘋果離體再生體系與遺傳轉(zhuǎn)化體系，提高果樹基因轉(zhuǎn)化效率，以‘宮藤’富士蘋果為試材，對其離體再生體系和農(nóng)桿菌介導(dǎo)的遺傳轉(zhuǎn)化體系進(jìn)行了研究。試驗結(jié)果表明：以‘宮藤’富士蘋果莖段為外植體，分別在初代培養(yǎng)基(MS+1.0 mg/L6-BA+100 mg/L．抗壞血酸)、繼代培養(yǎng)基(MS+1.0 mg/L6-BA+0.

2、01 mg/L NAA)、生根誘導(dǎo)培養(yǎng)基(1/2 MS+1.0 mg/LIBA)、生根培養(yǎng)基(1/2 MS)進(jìn)行初代培養(yǎng)、繼代培養(yǎng)、生根誘導(dǎo)培養(yǎng)和生根培養(yǎng)基可以獲得‘宮藤’富士蘋果再生植株：以‘宮藤’富士蘋果組培苗葉片為外植體，在MS+5.0 mg/L6-BA+1.0 mg/L NAA培養(yǎng)基上可以得到最高的再生效率，為73.3％，且葉片近軸面接觸培養(yǎng)基對葉片再生的效果好于遠(yuǎn)軸面接觸培養(yǎng)基。采用根癌農(nóng)桿菌介導(dǎo)法將擬南芥赤霉素信號傳導(dǎo)負(fù)調(diào)節(jié)